特許

J-GLOBAL ID：200903054207032369

糖鎖合成酵素の製造方法

発明者： 辻 崇一 ,  黒澤 信幸 ,  浜本 敏郎 ,  李 泳春 ,  中岡 隆志 ,  小島 直也
出願人/特許権者： 理化学研究所
代理人 (1件)： 塩澤 寿夫 (外1名)
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願平6-057369
公開番号（公開出願番号）：特開平7-255472
出願日： 1994年03月28日
公開日（公表日）： 1995年10月09日
要約：

【要約】【構成】 シアル酸転移酵素の製造方法であって、以下の工程:(a) シアル酸転移酵素を微生物中で発現させる工程;(b) 菌体内に蓄積するシアル酸転移酵素を含む蛋白凝集物または沈殿物から該酵素を 5-9 Mの尿素により抽出する工程;(c) 工程(b) で得られた抽出物を脱変性用組成物で希釈して例えば 1〜4 M の尿素を含む 1次希釈物を得る工程;(d) 工程(c) で得られた 1次希釈物をさらに脱変性用組成物で希釈して例えば 0.5〜2 M の尿素を含む 2次希釈物を得る工程;および(e) 工程(d) で得られた 2次希釈物から好ましくは 2価のカチオンの存在下で透析により尿素を除去して脱変性シアル酸転移酵素を得る工程を含む方法。【効果】 シアル酸転移酵素を微生物中で大量に発現させた場合にも、菌体内の凝集物あるいは沈殿物から高度に活性の回復した酵素を大量に回収することができるので有用である。

請求項（抜粋）：

シアル酸転移酵素の製造方法であって、以下の工程:(a) シアル酸転移酵素を微生物中で発現させる工程;(b) 菌体内に蓄積するシアル酸転移酵素を含む蛋白凝集物または沈殿物から該酵素を 5〜9Mの尿素により抽出する工程;(c) 工程(b) で得られた抽出物を脱変性用組成物で希釈して 1〜4 M の尿素を含む 1次希釈物を得る工程;(d) 工程(c) で得られた 1次希釈物をさらに脱変性用組成物で希釈して 0.5〜2M の尿素を含む 2次希釈物を得る工程;および(e) 工程(d) で得られた 2次希釈物を 2価のカチオンの存在下で透析して尿素を除去し脱変性シアル酸転移酵素を得る工程を含む方法。

IPC (5件)：

C12N 9/10 ,  C12N 1/21 ,  C12N 15/09 ZNA ,  C12R 1:19 ,  C12R 1:91

FI (2件)：

C12N 15/00 ZNA A ,  C12R 1:91