遺伝要素の組換え方法

発明者： ,
出願人/特許権者：
代理人 (1件)：小田島平吉
公報種別：公表公報
出願番号（国際出願番号）：特願2003-571431
公開番号（公開出願番号）：特表2005-523690
出願日： 2003年02月26日
公開日（公表日）： 2005年08月11日
要約：

遺伝子の組換え方法が開示される。この方法は、1つの鋳型の5’末端およびもう1つの鋳型の3’末端への相同性を有する不対フォワードおよびリバースプライマーの設計を包含する。短いプライマー伸長期間の結果として、ついで増幅されうる、対になった5’末端および3’末端を有する組換え鋳型を生じる。増幅されたサンプルは、親鋳型を含んでいない。

請求項（抜粋）：

a)少なくとも1つの二本鎖第一核酸鋳型および少なくとも1つの第二二本鎖核酸鋳型(ここで前記第一核酸鋳型のセンス鎖の5’領域は、前記第二核酸鋳型のセンス鎖の5’領域と異なる配列を有し、前記第一核酸鋳型のセンス鎖の3’領域は、前記第二核酸鋳型のセンス鎖の3’領域と異なる配列を有する)を準備し、 b)前記第一核酸鋳型のアンチセンス鎖の3’領域にのみアニールする、少なくとも1つのフォワードプライマーを準備し、 c)前記第二核酸鋳型のセンス鎖の3’領域にのみアニールする、少なくとも1つのリバースプライマーを準備し、 d)(a)の前記第一および第二核酸鋳型と複製組成物中の(b)および(c)の前記プライマーとを接触させ、これによって前記プライマーのプライマー誘導性伸長が生じ、 e)約1,000以下のヌクレオチドの付加後、(d)のプライマーの伸長を終結させ、 f)前記伸長されたフォワードおよびリバースプライマーを、前記第一および第二鋳型から分離し、 g)前記伸長されたフォワードおよびリバースプライマーを、前記第一および第二鋳型と再アニールさせ、これによって、前記伸長されたプライマーが、前記第一鋳型または第二鋳型のどちらかにアニールし、そして h)前記第一および第二二本鎖鋳型の組換えを含んでなる少なくとも1つの全長伸長産物が生成されるまで、工程(d)〜(g)を繰返すことを含んでなる目的とする核酸鋳型の組換え方法。

IPC (4件)：

C12N15/09 , C12N9/00 , C12N9/88 , C12P21/02

FI (6件)：

C12N15/00 A , C12N9/00 , C12N9/88 , C12P21/02 C , C12P21/02 H , C12P21/02 K

Fターム (42件)：

4B024AA01 , 4B024AA03 , 4B024AA05 , 4B024AA07 , 4B024AA20 , 4B024BA07 , 4B024BA21 , 4B024BA32 , 4B024CA04 , 4B024CA05 , 4B024CA06 , 4B024CA09 , 4B024CA11 , 4B024DA06 , 4B024EA04 , 4B024FA02 , 4B024FA07 , 4B024FA10 , 4B024GA11 , 4B024GA19 , 4B024GA25 , 4B024HA03 , 4B024HA08 , 4B024HA09 , 4B024HA14 , 4B050CC01 , 4B050CC03 , 4B050CC04 , 4B050DD02 , 4B050LL01 , 4B050LL02 , 4B050LL04 , 4B050LL05 , 4B050LL10 , 4B064AG01 , 4B064AG02 , 4B064AG13 , 4B064AG32 , 4B064CA02 , 4B064CA19 , 4B064CC24 , 4B064DA01

引用特許：

出願人引用 (12件)

米国特許第5,605,793号明細書
米国特許第5,965,408号明細書
米国特許第6,153,410号明細書

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審査官引用 (1件)

特許第6291242号

引用文献：

審査官引用 (5件)

Nucleic acids research. 2001, Vol.29, No.20, page e97(p.1-10)
Trends in biotechnology. 1998, Vol.16, No.2, p.76-82
Nucleic acids research. 1998, Vol.26, No.7, p.1819-1825

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