特許
J-GLOBAL ID：200903075126969444
高力価ウイルスの生産方法および哺乳動物細胞への効率のよいレトロウイルス媒介形質導入
発明者：
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出願人/特許権者：
代理人 (1件)：
平木 祐輔 (外2名)
公報種別：公表公報
出願番号（国際出願番号）：特願平7-502161
公開番号（公開出願番号）：特表平8-511169
出願日： 1994年06月10日
公開日（公表日）： 1996年11月26日
要約：
【要約】本発明は新規なレトロウイルスパッケージング系を提供するものであり、レトロウイルスパッケージング構築物、およびパッケージングベクター転写物がヒト細胞へのトランスフェクションにより高度発現プラスミドから生産される。高力価の組換えレトロウイルスが感染細胞において生産される。本発明の方法は、共培養により初代ヒト細胞(例えば、T細胞、ヒト造血幹細胞)に外来遺伝子を効率よく導入するための新規なレトロウイルス構築物の使用を含むものである。本発明は、高力価ウイルス上清の迅速な生産のために、また、通常の手段による形質導入では導入しにくい細胞に効率よく導入するために有用である。
請求項（抜粋）：
哺乳動物標的細胞に外来遺伝子を効率よく導入する方法であって、 A)ウイルス生産能のある哺乳動物細胞の第1集団を、 (i)複製能のないレトロウイルスベクターをパッケージするために、そして複製能のあるヘルパーウイルスの生産なしに該複製能のないレトロウイルスベクターを高力価でパッケージすることができるウイルス粒子タンパク質を生産するために必要とされる、全てのウイルス粒子タンパク質をトランスでコードする複製能のないレトロウイルスゲノム由来の少なくとも1つのレトロウイルスヘルパーDNA配列を含む少なくとも1つのレトロウイルスパッケージングプラスミド(ここで、該レトロウイルスヘルパーDNA配列は該ウイルスの5’LTRの天然エンハンサーおよび/またはプロモーターをコードする領域を欠き、さらにヘルパーゲノムのパッケージングに関与するプサイ機能配列と3’LTRの両方を欠き、そして所定の哺乳動物細胞内で機能する外来エンハンサーおよび/またはプロモーターならびにSV40ポリアデニル化部位をコードする);および (ii)外来遺伝子をコードするレトロウイルスベクター;で一時的に同時トランスフェクションして、第1集団の哺乳動物細胞内で外来遺伝子を担う複製欠損性組換えレトロウイルスベクターを生産し、そして B)外来遺伝子を担う複製欠損性組換えレトロウイルスベクターを生産する哺乳動物細胞の第1集団を哺乳動物標的細胞の第2集団と共に培養して第2集団の標的細胞に外来遺伝子を導入し、それにより外来遺伝子が効率よく導入された標的細胞を得る、 ことを含んでなる上記方法。
IPC (8件)：
C12N 15/09 ZNA
, C12N 5/10
, C12N 7/00
, A61K 31/70
, A61K 35/76
, A61K 48/00
, C07H 21/04
, C12R 1:92
C12N 15/00 ZNA A
, C12N 7/00
, A61K 31/70
, A61K 35/76
, A61K 48/00
, C07H 21/04 B
, C12N 5/00 B
