特許
J-GLOBAL ID:200903080785013084
フローサイトメトリーを用いるDNA塩基ミスマッチ検出
発明者:
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出願人/特許権者:
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代理人 (1件):
朝日奈 宗太 (外2名)
公報種別:公表公報
出願番号(国際出願番号):特願2000-518118
公開番号(公開出願番号):特表2003-502005
出願日: 1998年10月28日
公開日(公表日): 2003年01月21日
要約:
【要約】フローサイトメトリーDNA塩基ミスマッチ検出。フローサイトメトリーによる検出のための蛍光で標識化されており、ミスマッチを含むDNAを結合するための固定化ミスマッチ結合タンパク質被覆ミクロスフェアの使用が説明されている。目的のゲノムDNAは多くの技術の1つにより蛍光化される。得られる蛍光DNAは溶解され、再アニーリングされる。ゲノムサンプルが多型部位を含むとすれば、再度アニーリングされたDNAは塩基ミスマッチを含むであろう。固定化ミスマッチ結合タンパク質を運ぶミクロスフェアが、DNAサンプルに添加され、ミスマッチを含むDNAがミスマッチ結合タンパク質に結合される。つぎに、サンプルは、ミクロスフェアに結合された蛍光DNAを検出するために、フローサイトメトリーにより分析される。突然変異スキャニングのための現在のフローサイトメトリー法は、幾つかの重要な特徴を有する。これは、単一工程で、洗浄しない検定であり、迅速で感度の高い分析を行なうことができる。それは、完全配列決定に対して、サンプルを先行させるために、またはゲノムの既知の領域における突然変異を検出するために、増幅された領域を、多型の存在について迅速にスキャンするであろう。
請求項(抜粋):
(a) 調査中のDNAの蛍光標識化工程;(b) 固定されているミスマッチ結合タンパク質を運ぶミクロスフェアの製造工程;(c) ミスマッチ結合タンパク質を固定したミクロスフェアとDNAの蛍光標識化サンプルとをインキュベートして、ミスマッチを含む蛍光標識化DNAがそのミクロスフェアに結合するインキュベート工程;および(d) フローサイトメトリーによる、ミスマッチを含む蛍光標識化DNAの検出工程からなるミスマッチを含むDNAを検出するための方法。
IPC (2件):
FI (2件):
C12Q 1/68 A
, C12N 15/00 A
Fターム (20件):
4B024AA11
, 4B024AA20
, 4B024CA01
, 4B024CA20
, 4B024DA06
, 4B024HA11
, 4B063QA01
, 4B063QA17
, 4B063QQ06
, 4B063QQ42
, 4B063QR08
, 4B063QR14
, 4B063QR48
, 4B063QR62
, 4B063QR66
, 4B063QR82
, 4B063QS03
, 4B063QS25
, 4B063QS39
, 4B063QX02
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