特許

J-GLOBAL ID：200903094987637641

水性及び非水性媒質において増強された活性を持つパラニトロベンジルエステラーゼ

発明者： アーノルド,フランシス・エイチ ,  ムーア,ジェフリー・シー
出願人/特許権者： カリフォルニア・インスティチュート・オブ・テクノロジー
代理人 (1件)： 社本 一夫 (外5名)
公報種別：公表公報
出願番号（国際出願番号）：特願平9-527037
公開番号（公開出願番号）：特表2001-517926
出願日： 1997年01月16日
公開日（公表日）： 2001年10月09日
要約：

【要約】選択した基質に対してかつ選択した反応条件下で、未修飾のパラ-ニトロベンジルエステラーゼと比較して改良された安定性及び/またはエステラーゼ加水分解活性を示す、修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼを単離し、同定する方法。この方法は、未修飾のパラ-ニトロベンジルエステラーゼをコードする核酸部分(遺伝子)とは異なるヌクレオチド配列を持つ、修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼの核酸部分のライブラリーを調製することを含む。修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼの核酸部分のライブラリーを発現させ、修飾を加えた多数の酵素を提供する。その後、修飾を加えた酵素を発現するクローンをスクリーニングし、それらの酵素の選択した反応条件下で選択した基質を加水分解する能力を測定することによって、酵素が改良されたエステラーゼ活性を持つことを同定する。未修飾の、天然に存在するパラ-ニトロベンジルエステラーゼの安定性及び/またはエステル加水分解活性と比較して、水性あるいは含水有機媒質において改良された安定性及び/またはエステル加水分解活性を持つ、特定の、修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼを開示する。

請求項（抜粋）：

水性あるいは含水有機媒質における未修飾のパラ-ニトロベンジルエステラーゼの安定性及び/またはエステル加水分解活性と比較して、水性及び含水有機媒質における安定性及び/またはエステル加水分解活性を改良した修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼであって、前記未修飾のパラ-ニトロベンジルエステラーゼが1から489まで連続した範囲の番号の位置を含むアミノ酸配列を有し、前記修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼが、アミノ酸位置番号60、94、96、144、267、271、322、334、343、358及び370からなる群から選択される一つまたはそれ以上のアミノ酸の位置でアミノ酸を置換することにより修飾を加えた未修飾のパラ-ニトロベンジルエステラーゼからなる、前記修飾を加えたパラ-ニトロベンジルエステラーゼ。

IPC (6件)：

C12N 15/09 ZNA ,  C12N 1/15 ,  C12N 1/19 ,  C12N 1/21 ,  C12N 5/10 ,  C12N 9/18

FI (6件)：

C12N 1/15 ,  C12N 1/19 ,  C12N 1/21 ,  C12N 9/18 ,  C12N 15/00 ZNA A ,  C12N 5/00 A