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J-GLOBAL ID：201002228025045380   整理番号：10A0947736

スクリーニングせずに形質細胞の抗体可変部遺伝子群を解析してモノクローナル抗体を単離する

Monoclonal antibodies isolated without screening by analyzing the variable-gene repertoire of plasma cells

著者 (12件)： REDDY Sai T (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  GE Xin (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  KANG Seung Hyun (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  CHRYSOSTOMOU Constantine (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  GEORGIOU George (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  HOI Kam Hon (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  MIKLOS Aleksandr E (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  HUGHES Randall A (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  HUNICKE-SMITH Scott P (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  IVERSON Brent L (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  TUCKER Philip W (Univ. Texas at Austin, Texas, USA) ,  ELLINGTON Andrew D (Univ. Texas at Austin, Texas, USA)
資料名： Nature Biotechnology  (Nature Biotechnology)
巻： 28  号： 9  ページ： 965-969  発行年： 2010年09月 
JST資料番号： H0870A  ISSN： 1087-0156  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 短報  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 抗原特異的なモノクローナル抗体(mAb)および抗体断片の単離は,不死化B細胞または組み換え抗体ライブラリーの高処理能スクリーニングに依存している。我々は,高処理能DNA配列解読およびバイオインフォマティクス的解析を用いてこのスクリーニング工程を回避し,免疫化マウスの骨髄形質細胞(BMPC)から抗体可変領域(V)遺伝子群の検索を行った。不死化させることができないBMPCは,循環血中抗体の大部分を産生している。我々は,BMPCのV遺伝子群が免疫化後に大きく偏り,最も多い配列が全体の約1%から10%超の頻度で生ずることを明らかにした。相対頻度に基づいて,最も多い重鎖可変部(V_H)遺伝子と軽鎖可変部(V_L)遺伝子とを組み合わせ,自動遺伝子合成でその再構成を行い,細菌または哺乳類細胞に組み換え抗体を発現させた。それぞれ3つの抗原のうち1つによって免疫化されたマウス6匹からこの方法で作製された抗体は,圧倒的な抗原特異性を示した(21/27,78%)。血清力価の高いマウスから得られた抗体は,ナノモル単位の結合親和性を示した。Copyright Nature Publishing Group 2010

シソーラス用語： *モノクローナル抗体 ,  *形質細胞 ,  ヌクレオチド配列 ,  マウス ,  *抗体 ,  免疫グロブリンフラグメント ,  遺伝子 ,  *遺伝子操作 ,  *組換タンパク質 ,  *遺伝子発現 ,  分子認識 ,  大腸菌 ,  HEK293細胞 ,  HEK293F細胞 ,  ゲノミクス ,  バイオインフォマティクス ,  抗原特異性 ,  *組換抗体 ,  免疫グロブリン可変領域 ,  ネズミ亜目 ,  *分子遺伝現象 ,  微生物
準シソーラス用語： 軽鎖フラグメント遺伝子 ,  抗体可変領域遺伝子 ,  重鎖フラグメント遺伝子

分類 (2件)： 抗原・抗体・補体の生産と応用  (ED04030W) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (7件)： スクリーニング ,  形質細胞 ,  抗体 ,  遺伝子群 ,  解析 ,  モノクローナル抗体 ,  単離