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J-GLOBAL ID:201002230071713219   整理番号:10A0363824

Haloferax volcaniiにおけるHisタグ付加蛋白質の条件付過剰発現のための菌株とプラスミドベクターの改良

Improved Strains and Plasmid Vectors for Conditional Overexpression of His-Tagged Proteins in Haloferax volcanii
著者 (5件):
資料名:
巻: 76  号:ページ: 1759-1769  発行年: 2010年03月 
JST資料番号: A0427A  ISSN: 0099-2240  CODEN: AEMIDF  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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H.volcaniiにおいて酸性アミノ酸を多く含む好塩性細菌蛋白質の過剰生産のための宿主,プラスミドベクターの開発を行った。このベクタープラスミドはH.volcaniiのtnaA遺伝子由来のトリプトファン誘導性プロモーターp.tnaAと,金属アフィニティークロマトグラフィーによる蛋白質精製を容易にするため6xHisを融合したもので,宿主のpitA遺伝子をNatronomonas pharaonis由来のリンカー部にHisがないオルソログpitANphaで置換し,Hisタグ蛋白質の精製を容易にした。H.volcaniiの制限エンドヌクレアーゼ遺伝子mrrをpop-in/pop-out法で欠失したH.volcaniiΔmrr変異株を用いてDNAを大腸菌dam変異株の経由なしで直接形質転換することができた。Mrrは外来DNAに対して防御機能を示した。
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分類 (2件):
分類
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遺伝子操作  ,  微生物代謝産物の生産 

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