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J-GLOBAL ID：201002232121670381   整理番号：10A0581703

C型肝炎ウイルスRNA依存性RNAポリメラーゼの阻害剤をスクリーニングする細胞に基づくレポーター分析

A cell-based reporter assay for inhibitor screening of hepatitis C virus RNA-dependent RNA polymerase

著者 (7件)： LEE Jin-ching (Dep. of Biotechnology, Coll. of Life Sci., Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN) ,  LEE Jin-ching (Graduate Inst. of Natural Products, Coll. of Pharmacy, Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN) ,  TSENG Chin-kai (Dep. of Biotechnology, Coll. of Life Sci., Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN) ,  CHEN Kuan-jen (Dep. of Biotechnology, Coll. of Life Sci., Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN) ,  HUANG Kuo-jung (Dep. of Biotechnology, Coll. of Life Sci., Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN) ,  LIN Chun-kuang (Dep. of Biotechnology, Coll. of Life Sci., Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN) ,  LIN Ying-ting (Dep. of Biotechnology, Coll. of Life Sci., Kaohsiung Medical Univ., Kaohsiung, Taiwan, TWN)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 403  号： 1-2  ページ： 52-62  発行年： 2010年08月 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： C型肝炎ウイルス(HCV)NS5B,RNA依存性RNAポリメラーゼ(RdRp)は,抗HCV剤の魅力的標的である。in vitro RNA合成を含む通常使用されるポリメラーゼ阻害剤スクリーニングの主要不利点は,化合物の細胞透過性と細胞毒性を立証できないことである。この制限を克服するために,細胞毒性と細胞内RdRb活性を同時測定できる,安定トランスフェクションNS5Bとビシストロンレポーター遺伝子,(+)Fluc-(-)UTR-RLucを持つBHK-NS5B-FRLucレポーター細胞系列を生成した。(+)Fluc-(-)UTR-RLuc構築物は,HCV5′-と3′-非翻訳領域(UTR)両負鎖に隣接した逆配置のホタルルシフェラーゼ(FLuc)とRenillaルシフェラーゼ(RLuc)から成った。FLucとRLucレポーター蛋白質,それぞれは宿主ポリメラーゼと機能性NS5Bポリメラーゼにより調節されている,NS5B重合化の特異剤を用いて,この系を検証した。さらに,この分析を96ウェルプレートで行った。Z′係数値は約0.75で,高処理スクリーニング操作を容易にすることが可能であった。とりわけ,構造に基づくバーチャルスクリーニングとの組み合わせで,イミダゾール誘導体化合物がHCVRdRp阻害剤候補であると評価した。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *RNAポリメラーゼ ,  *酵素阻害剤 ,  C型肝炎ウイルス ,  抗ウイルス薬 ,  ルシフェラーゼ ,  *バイオアッセイ ,  培養細胞 ,  スクリーニング ,  ウイルスタンパク質 ,  細胞毒性 ,  窒素複素環化合物
準シソーラス用語： BHK細胞 ,  *DNA依存性RNAポリメラーゼ ,  HTS ,  NS5B蛋白質 ,  イミダゾール誘導体

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  抗ウイルス薬の基礎研究  (GW17040O)

物質索引 (2件)： 1-トシル-2-(2,4-ジニトロフェニルチオ)-5-メチル-1H-ベンゾイミダゾール ,  ウェデロラクトン

タイトルに関連する用語 (6件)： C型肝炎ウイルス ,  RNA依存性RNAポリメラーゼ ,  阻害剤 ,  スクリーニング ,  細胞 ,  分析