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J-GLOBAL ID：201002236035488126   整理番号：10A0309232

昆虫組換カテプシンB様対抗-防御蛋白質の非規定Asn-X-Cys配列でのN-グリコシル化

N-glycosylation at non-canonical Asn-X-Cys sequence of an insect recombinant cathepsin B-like counter-defense protein

著者 (10件)： CHI Yong Hun (Dep. of Entomology, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA) ,  CHI Yong Hun (Div. of Applied Life Sciences, Environmental Biotechnology National Core Res. Center, Gyeongsang National Univ. ...) ,  KOO Yoon Duck (Dep. of Entomology, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA) ,  DAI Susie Y. (Office of the Texas State Chemist, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA) ,  DAI Susie Y. (Dep. of Veterinary Pathobiology, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA) ,  AHN Ji-eun (Dep. of Entomology, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA) ,  YUN Dae-jin (Div. of Applied Life Sciences, Environmental Biotechnology National Core Res. Center, Gyeongsang National Univ. ...) ,  LEE Sang Yeol (Div. of Applied Life Sciences, Environmental Biotechnology National Core Res. Center, Gyeongsang National Univ. ...) ,  ZHU-SALZMAN Keyan (Dep. of Entomology, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA) ,  ZHU-SALZMAN Keyan (Vegetable and Fruit Improvement Center, Texas A&M Univ., Coll. Station, TX 77843, USA)
資料名： Comparative Biochemistry and Physiology. B. Biochemistry and Molecular Biology  (Comparative Biochemistry and Physiology. B. Biochemistry and Molecular Biology)
巻： 156  号： 1  ページ： 40-47  発行年： 2010年05月 
JST資料番号： A0956B  ISSN： 1096-4959  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ササゲマメゾウムシカテプシンB様システインプロテアーゼCmCatBは,餌投与プロテアーゼ阻害剤への昆虫の対応を促進する。Pichia pastoris系を用いた組換CmCatBの発現により,不均一にグリコシル化され,SDS-PAGE上で≧50kDaの塗布標本として移動する酵素活性蛋白質を生産した。ペプチド:N-グリコシダーゼFを用いた処理により,N-グリコシル化は優勢であることを示した。CmCatBは3つのN-グリコシル化Asn-X-Ser/Thr共通配列を含んだ。部位特異的変異誘発を介した3つの全Asn残基のGlnとの同時置換により,完全な非グリコシル化蛋白質を生じず,付加的な非定型グリコシル化部位の存在を示唆した。次いで,CmCatBの2つのAsn-X-Cys部位(Asn¹⁰⁰及びAsn²³⁶)での潜在的N-グリコシル化を研究した。規定部位(m1m2,Asn⁹⁷→Gln及びAsn²⁰⁷→Gln)での二重変異の背景によるAsn¹⁰⁰-X-CysでのAsnのGlnへの置換は,ゲル上において1つの異なるバンド,すなわちm1m2c1(Asn⁹⁷→Gln,Asn²⁰⁷→Gln及びAsn¹⁰⁰→Gln)をもたらした。しかしながら,もう1つの3元変異体蛋白質m1m2c2(Asn⁹⁷→Gln,Asn²⁰⁷→Gln及びAsn²³⁶→Gln)及び4元変異体蛋白質m1m2c1c2は,Pichia細胞において発現しなかった。したがって,Asn²³⁶は蛋白質発現におそらく必要であるが,Asn¹⁰⁰は非規定グリコシル化をもたらすように見えた。特にAsn¹⁰⁰での炭水化物分子の除去は蛋白質分解活性をかなり高進したが,蛋白質安定性を障害した。したがって,グリコシル化はCmCatBの生化学的性質に顕著に影響した。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *マメゾウムシ科 ,  *システインプロテイナーゼ ,  カテプシン ,  グリコシル化 ,  組換タンパク質 ,  Pichia ,  アミノ酸配列 ,  アミノ酸残基 ,  部位特異的変異誘発 ,  突然変異体 ,  生体防御 ,  塩基対置換 ,  酵素活性度 ,  安定性 ,  分子モデル
準シソーラス用語： N-グリコシル化 ,  Pichia pastoris ,  アミノ酸置換 ,  カテプシンB ,  *ササゲマメゾウムシ ,  酵素安定性

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  動物の生化学  (EJ01050P)

タイトルに関連する用語 (7件)： 昆虫 ,  組換 ,  カテプシンB ,  防御 ,  蛋白質 ,  規定 ,  N-グリコシル化