文献

J-GLOBAL ID：201002237924875316   整理番号：10A0052872

E.coliにおける非天然アミノ酸突然変異に対する強化系

An Enhanced System for Unnatural Amino Acid Mutagenesis in E. coli

著者 (4件)： YOUNG Travis S. (Dep. of Chemistry and the Skaggs Inst. for Chemical Biology, The Scripps Res. Inst., 10550 North Torrey Pines Road ...) ,  AHMAD Insha (Dep. of Chemistry and the Skaggs Inst. for Chemical Biology, The Scripps Res. Inst., 10550 North Torrey Pines Road ...) ,  YIN Jun A. (Dep. of Chemistry and the Skaggs Inst. for Chemical Biology, The Scripps Res. Inst., 10550 North Torrey Pines Road ...) ,  SCHULTZ Peter G. (Dep. of Chemistry and the Skaggs Inst. for Chemical Biology, The Scripps Res. Inst., 10550 North Torrey Pines Road ...)
資料名： Journal of Molecular Biology  (Journal of Molecular Biology)
巻： 395  号： 2  ページ： 361-374  発行年： 2010年01月15日 
JST資料番号： D0124B  ISSN： 0022-2836  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 進化型Methanocaldococcus jannaschiiアミノアシル-tRNAシンテターゼ(aaRS)/サプレサーtRNAペアを使用して,Escherichia coliにおける蛋白質への非天然のアミノ酸の取り込みのための新しいベクター,pEVOLを報告した。この新しい系は,M.jannaschii aaRS遺伝子の2つのコピーの転写を促進する両構成型と誘導型プロモーターの使用を通して,変異体蛋白質の高い収率を与えることができる。収率は,単一のベクター構成物中に新しく最適されたサプレッサーtRNA_CUA^optを持つ,二重のaaRSプロモーター系を結合することによりさらに増加した。最適化されたサプレッサーtRNA_CUA^optは,非天然アミノ酸突然変異のために以前に報告されたベクターと比べ増加したプラスミド安定性を提供した。この新しい系の有用性を示すために,pEVOLへ14の変異体aaRSを導入し,精子クジラミオグロビン,あるいは緑色蛍光蛋白質中の3つの独立したアンバーナンセンスコドンに応答した非天然アミノ酸を挿入するそれらの能力を比較した。振盪フラスコ中の富栄養培地で培養した時,pEVOLは変異体GroEL蛋白質100mg/L以上を産生する能力があった。用途の広さ,増加した収率,およびpEVOLベクターの増加した安定性は,非天然アミノ酸を持つ蛋白質の発現をさらに促進するであろう。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： サプレッサーtRNA ,  アミノアシルtRNAシンテターゼ ,  *遺伝学実験技術 ,  突然変異体 ,  大腸菌 ,  メタン生成細菌 ,  ナンセンス突然変異 ,  プロモーター領域 ,  プラスミド ,  ミオグロビン ,  緑色蛍光タンパク質 ,  クジラ類
準シソーラス用語： Methanocaldococcus jannaschii ,  アンバー変異 ,  *非天然アミノ酸導入

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

物質索引 (14件)： 4-アジドフェニルアラニン ,  4-シアノフェニルアラニン ,  4-ボロノ-L-フェニルアラニン ,  4-ヨードフェニルアラニン ,  4-アセチルフェニルアラニン ,  4-ベンゾイルフェニルアラニン ,  4-(プロパルギルオキシ)フェニルアラニン ,  2-(4-ヒドロキシフェニル)-L-乳酸 ,  4-(カルボキシメチル)フェニルアラニン ,  3-(2-ナフチル)アラニン ,  2-ニトロフェニルアラニン ,  3-(8-ヒドロキシ-3-キノリル)アラニン ,  3-(2,2′-ビピリジン-5-イル)アラニン ,  2-[2-(7-ヒドロキシ-2H-1-ベンゾピラン-4-イル)エチル]グリシン

タイトルに関連する用語 (3件)： 非天然アミノ酸 ,  突然変異 ,  強化