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J-GLOBAL ID：201002238019470635   整理番号：10A0082452

ユウロピウム-テトラアザシクロドデシル四酢酸-標識リガンド-受容体相互作用の検出に対する時間分解蛍光分析の最適化

Optimization of time-resolved fluorescence assay for detection of europium-tetraazacyclododecyltetraacetic acid-labeled ligand-receptor interactions

著者 (7件)： DE SILVA Channa R. (Dep. of Chemistry, Univ. of Arizona, Tucson, AZ 85721, USA) ,  VAGNER Josef (Bio5 Inst., Univ. of Arizona, Tucson, AZ 85719, USA) ,  LYNCH Ronald (Bio5 Inst., Univ. of Arizona, Tucson, AZ 85719, USA) ,  LYNCH Ronald (Dep. of Physiology, Univ. of Arizona, Tucson, AZ 85719, USA) ,  GILLIES Robert J. (H. Lee Moffitt Center and Res. Inst., Tampa, FL 33612, USA) ,  HRUBY Victor J. (Dep. of Chemistry, Univ. of Arizona, Tucson, AZ 85721, USA) ,  HRUBY Victor J. (Bio5 Inst., Univ. of Arizona, Tucson, AZ 85719, USA)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 398  号： 1  ページ： 15-23  発行年： 2010年03月01日 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ランタニドに基づく発光リガンド結合分析は大量処理スクリーニングで感度及び結合可能性の改善と同時に放射能を使用しないため従来の放射性標識分析より優れている。ジエチレントリアミン五酢酸(DTPA)誘導体のようなランタニド(III)配位結合キレート化剤を用いたかなりの進歩にもかかわらず,解離促進ランタニド蛍光免疫分析(DELFIAS)は錯体からのランタニド(III)イオンの不完全な放出のため,より安定的なキレート化剤(例,テトラアザシクロドデシル四酢酸[DOTA]誘導体)をまだうまく使用していない。本報で,酸処理プロトコールを取り込んでいる改良及び最適化DELFIA操作をEu(III)-DOTA標識ペプチドの使用に導入する。発光増強段階の前に塩酸(2.0M)を用いてDOTA標識リガンドからのEu(III)イオンの完全な放出を観察した。Eu(III)-DOTA標識[Nle⁴,D-Phe⁷]-α-メラニン細胞刺激ホルモン(NDP-αMSH)を合成し,改良プロトコールを用いてヒトメラノコルチン-4(hMC4)受容体を過剰発現している細胞への結合親和性を評価した。結合データはEu(III)-DOTA結合ペプチドがそのDOTA類似体と類似の親和性を有するこれらの細胞へ結合したことを示している。改良DELFIA操作は更に,hMC4及びコレシストキニン-2(CCK-2)受容体の両者を発現している細胞に対するEu(III)-DOTA標識ヘテロ二価ペプチドの結合を監視するのに使用された。改良分析法は優れた結果を提供し,リガンドライブラリーの大量スクリーニングに対して適切である。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *ユウロピウム ,  発光分析 ,  時間分解分光法 ,  蛍光分析 ,  最適条件 ,  処理 ,  スクリーニング ,  感度 ,  配位子 ,  配位結合 ,  キレート剤 ,  *蛍光抗体法 ,  錯体 ,  ペプチド ,  発光 ,  塩酸 ,  ヒト ,  *ホルモン受容体 ,  *情報伝達受容体 ,  *膜タンパク質 ,  遺伝子発現 ,  親和性 ,  コレシストキニン受容体 ,  固相合成 ,  ペプチド合成 ,  標識法 ,  監視 ,  分子間相互作用 ,  *誘導体化 ,  ポリペプチド ,  MSH【ホルモン】
準シソーラス用語： キレート化剤 ,  コレシストキニン-2受容体 ,  *テトラアザシクロドデシル四酢酸誘導体 ,  メラニン細胞刺激ホルモン ,  メラノコルチン受容体4 ,  *メラノコルチン-4受容体 ,  リガンド ,  *解離促進ランタニド蛍光免疫分析 ,  蛍光免疫分析 ,  固相ペプチド合成 ,  時間分解蛍光分析 ,  酢酸誘導体 ,  大量処理 ,  蛋白質相互作用 ,  配位結合キレート化剤

分類 (4件)： 細胞膜の受容体  (EF04030C) ,  遺伝子発現  (EC02040Q) ,  免疫反応一般  (ED03010T) ,  バイオアッセイ  (EA03060N)

物質索引 (1件)： α-MSH【ヒト】

タイトルに関連する用語 (8件)： ユウロピウム ,  酢酸 ,  標識リガンド ,  受容体 ,  相互作用 ,  時間分解蛍光 ,  分析 ,  最適化