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J-GLOBAL ID:201002245927891838   整理番号:10A0409648

チスイコウモリ(Desmodus rotundus)からの唾液プラスミノーゲン活性化因子を発現するPichia pastoris系統の構築

Construction of Pichia pastoris strain expressing salivary plasminogen activator from vampire bat (Desmodus rotundus)
著者 (5件):
資料名:
巻: 25  号:ページ: 566-574  発行年: 2009年 
JST資料番号: C2184A  ISSN: 1000-3061  CODEN: SGXUED  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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チスイコウモリ唾液は,飼育の間これらの吸血性動物を推定上援助するプラスミノーゲン活性化因子を含む。Bat-PA(H),チスイコウモリの唾液のプラスミノーゲン活性化因子(DSPAαl)の等身大の方式が,組織型プラスミノーゲン活性化剤(t-PA)に対して相同の,そして,同様の有効性がある。活性の厳しいフィブリン依存性は,線溶療法において望ましい特性曲線である。増進神経変性を行うユニークなフィブリン分解酵素である。この研究で,チスイコウモリ(D.rotundus)プラスミノーゲン活性化因子の遺伝子配列(GenBank増加No.J05082)を記録することによって,それは,それは,生体外においてDSPAalの完全な配列を統合する最初の時間である。発現ベクターpPIC9Kにそのクローンをつくる。組換えプラスミドは,PichiapastorisGS115品種へ線状にして変える。組換え型のDSPAalの分泌式は,メタノール誘導によって達成した。そして分子量は47kDであった。蛋白質の多量での組換え型のGS115を得るために,彼の何百もの+形質転換細胞は,高水準G418(2-4マグネシウム/ml)に対する分離は耐性のクローンを作るために選別した。選択されたクローンは,Pichia pastorisにおいて小さな発現をした。そして,それらのfibrinolytic活性をテストして,フィブリン棚段試験とSDS-PAGEによってタンパク質バンドを発現した。DSPAalはSDS-PAGEの後に吸光度で決定した。揚水量は約30マグネシウムPERリットルの発酵培養である。DSPAalは,しばしばほ乳動物細胞,チャイニーズハムスター(CHO)細胞,幼児ハムスター腎(BHK)細胞,COS細胞から派生した。それは,高コストにおいて生産した。Pichiapastorisにおいて,それは,より高い揚水量と低価法を期待する。したがって,それは新しい血栓溶解剤候補として役立つことができる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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分類 (1件):
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動物の生化学 

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