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J-GLOBAL ID:201002259537434950   整理番号:10A0361993

2種類のリポソーム製剤短干渉RNA二本鎖を同時分析する,逆相高速液体クロマトグラフィー法

Reversed-phase high-performance liquid chromatography method for simultaneous analysis of two liposome-formulated short interfering RNA duplexes
著者 (5件):
資料名:
巻: 401  号:ページ: 61-67  発行年: 2010年06月01日 
JST資料番号: H0177B  ISSN: 0003-2697  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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短干渉RNA(siRNA)が誘発する遺伝子サイレンシングのゲノム研究における有用性が判明した。それで,治療用途の大きな可能性を持つ。しかし,siRNAは速やかに体内に吸収されない。カチオン性リポソームは薬物製剤をヌクレアーゼから効果的に保護して,希望標的組織への分布を可能にする。製剤のsiRNA量は正確に測定しなければならない。リポソームの2種類のsiRNA二本鎖を,試料前処理なしに分離して,正確に定量する,安定性表示,イオン対,逆相高速液体クロマトグラフィー法を開発した。勾配移動相系は,385nMヘキサフルオロ-2-プロパノール,14.5mMトリエチルアミン,5%メタノール(移動相A)と385nMヘキサフルオロ-2-プロパノール,14.5mMトリエチルアミン,90%メタノール(移動相B)から構成された。用いたカラムはXBridge C18カラム(50x2.1mm内径,2.5μm粒子サイズ)で,分離は60°Cで行った。260nmの紫外(UV)検出により定量した。両siRNA二本鎖の一本鎖の,10から110μg/mlに至る濃度範囲の直線性を確証した。測定精度を4濃度の反復分析(n=5)により決定した(R2>0.996,1~4%の相対標準偏差[RSD])。質量分析検出に適合するイオン対合試薬が,この方法による液体クロマトグラフィー-質量分析(LC-MS)不純物プロファイリングを可能にした。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (3件):
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薬物の分析  ,  分子遺伝学一般  ,  有機化合物のクロマトグラフィー,電気泳動分析 
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