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J-GLOBAL ID:201002260649373706   整理番号:10A0726396

dNTP模擬性配位子のコンビナトリアルライブラリーから選択した9-アミノエチルアデニン-(1,6-ジアミン-ヘキサン)-トリアジン上M-MLVH-RTの精製

Purification of M-MLVH-RT on a 9-Aminoethyladenine-(1,6-diamine-hexane)-triazine Selected from a Combinatorial Library of dNTP-Mimetic Ligands
著者 (4件):
資料名:
巻: 48  号:ページ: 496-502  発行年: 2010年07月 
JST資料番号: H0493A  ISSN: 0021-9665  CODEN: JCHSBZ  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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組み替え大腸菌細胞から誘導したRNアーゼH活性の欠けたMoloneyマウス白血病ウイルス逆転写酵素(M-MLVH-RT)のアフィニティークロマトグラフィーによる精製に適した配位子を選択するために,模擬デオキシリボヌクレオチド三リン酸(dNTP)配位子ライブラリーを探した。その結果,同じトリアジン骨格に9-アミノエチルアデニンと1,6-ジアミン-ヘキサンを持つ配位子(AEAd)を選択した。AEAdをアガロースに固定化し充填したカラム(1mL,湿りゲル質量0.9g)を20mM Tris-HCl(pH7.5)で平衡にした後,抽出したM-MLVH-RT(10mL,蛋白質として1mg)を注入し,洗浄後,60mM KClを含む20mM Tris-HCl緩衝液(pH7.5)4mLで脱離した。透析及び凍結乾燥後,SDS-PAGEで分析した。その結果,核酸類の存在は認めず,一つのバンドだけが現れ,ヌクレアーゼ活性を示す結果を得た。
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分類 (3件):
分類
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有機物質のクロマトグラフィー,電気泳動分析一般  ,  生化学的分析法  ,  酵素一般 

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