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J-GLOBAL ID：201002272367549966   整理番号：10A0308630

ヒト血清炭酸アンヒドラーゼIIを定量する,磁性ビーズを用いた免疫沈降と液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析

Immunoprecipitation on magnetic beads and liquid chromatography-tandem mass spectrometry for carbonic anhydrase II quantification in human serum

著者 (6件)： CALLIPO Luciano (Dep. of Chemistry, Sapienza Univ. of Rome, 00185 Roma, ITA) ,  CARUSO Giuseppe (Dep. of Chemistry, Sapienza Univ. of Rome, 00185 Roma, ITA) ,  FOGLIA Patrizia (Dep. of Chemistry, Sapienza Univ. of Rome, 00185 Roma, ITA) ,  GUBBIOTTI Riccardo (Dep. of Chemistry, Sapienza Univ. of Rome, 00185 Roma, ITA) ,  SAMPERI Roberto (Dep. of Chemistry, Sapienza Univ. of Rome, 00185 Roma, ITA) ,  LAGANA Aldo (Dep. of Chemistry, Sapienza Univ. of Rome, 00185 Roma, ITA)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 400  号： 2  ページ： 195-202  発行年： 2010年05月15日 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 蛋白質炭酸アンヒドラーゼII(CAII)の高処理捕獲に利用できる磁性ビーズに基づく基盤を示した。この方法の鍵となる段階は,血清の標的蛋白質免疫親和性精製,続く代理ペプチドを遊離するトリプシンによるオンビーズ消化を含んだ。このトリプシン分解ペプチドを多重反応モニタリング収集モードで操作した液体クロマトグラフィー-エレクトロスプレイイオン化-タンデム質量分析(LC-ESI-MS/MS)により定量した。合成ペプチド標準と構造アナログ無標識内部標準を用いて,得られた濃度を化学量論的にCAII血清濃度に変換した。免疫ビーズ調製,蛋白質捕獲,蛋白質分解,較正のような分析段階を最適化した。この方法を,回収率(77%),再現性(相対標準偏差[RSD]<12%),検出限界(0.5pモル/ml)の点から検証した。開発した方法を8人の健常被験者のCAII測定に用いた。その測定濃度は27.3pモル/ml(RSD=65%)であった。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *炭酸アンヒドラーゼ ,  粒状材 ,  *LC-MS分析 ,  *タンデム質量分析 ,  エレクトロスプレイイオン化質量分析 ,  血清中濃度 ,  タンパク質分解 ,  内部標準法 ,  *免疫吸着剤
準シソーラス用語： ESI-MS/MS ,  *LC-MS/MS分析 ,  トリプシン分解 ,  磁性ビーズ

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  有機化合物の物理分析  (CC03034A)

タイトルに関連する用語 (6件)： ヒト血清 ,  炭酸アンヒドラーゼII ,  定量 ,  磁性ビーズ ,  免疫沈降 ,  液体クロマトグラフィー-タンデム質量分析