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J-GLOBAL ID：201002275194490188   整理番号：10A0214099

ラットモノアミンオキシダーゼA(MAO A)のPichia pastorisでの大量発現と精製:ヒトMAO Aとの比較

High-level expression and purification of rat monoamine oxidase A (MAO A) in Pichia pastoris: Comparison with human MAO A

著者 (2件)： WANG Jin (Dep. of Biochemistry, Emory Univ., Rollins Res. Center, 1510 Clifton Rd., Atlanta, GA 30322, USA) ,  EDMONDSON Dale E. (Dep. of Biochemistry, Emory Univ., Rollins Res. Center, 1510 Clifton Rd., Atlanta, GA 30322, USA)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 70  号： 2  ページ： 211-217  発行年： 2010年04月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 組換え膜結合型ラット肝臓モノアミンオキシダーゼA(MAO A)のPichia pastorisでの大量異種発現,精製および特性解析について記載した。細胞の1リットル培養で約700UのラットMAO A活性を生産した。ラットMAO A活性は細胞のミトコンドリア外膜に見出された。ヒトMAO A精製法の変法を使い,43%の収率で約200mgの組換えラットMAO Aを精製し,SDS-PAGEでの分子量は約60kDaであった。精製酵素は共有結合しているFADを有し,クロルギリンによる阻害でN(5)フラボシアニン付加物を形成した。Edman配列から,ラットMAO Aのアミノ末端はスレオニン残基のN末端でブロックされていることを示した。精製ラット酵素は精製ヒトMAO Aより高い熱安定性を示した。ヒトMAO Aとの比較で,ラットMAO Aは2倍高いk _cat/K _m値でセロトニンあるいはキヌラミンを酸化し,6.7倍高い触媒効率でフェネチルアミン,約40倍高い触媒効率でベンジルアミンを酸化した。配列上はヒトMAO Aと約90%が同一であるが,ラットMAO Aはアミン神経伝達物質の酸化に対し,より効率的な触媒であった。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *ラット ,  *モノアミンオキシダーゼ ,  *Pichia ,  *遺伝子発現 ,  *精製 ,  ヒト ,  培養 ,  酵素活性度 ,  ミトコンドリア膜 ,  収率 ,  組換タンパク質 ,  SDS-PAGE ,  分子量 ,  共有結合 ,  ジヌクレオチド ,  芳香族塩素化合物 ,  付加物 ,  構造解析 ,  アミノ酸配列 ,  末端基 ,  アミノ酸残基 ,  熱安定性 ,  Michaelis定数 ,  第一アミン ,  酸化 ,  効率 ,  神経伝達物質 ,  肝臓 ,  フラビン酵素 ,  酵素反応速度論 ,  アルコール ,  窒素複素環化合物 ,  アデニンヌクレオチド ,  ウレア化合物 ,  芳香族縮合化合物 ,  芳香族アミン ,  芳香族ケトン ,  ジアミン ,  アセチレン化合物 ,  フェノールエーテル
準シソーラス用語： Edman分解 ,  *Pichia pastoris ,  アミノ末端 ,  ミトコンドリア外膜 ,  *モノアミンオキシダーゼA ,  液体培養 ,  触媒効率

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  動物の生化学  (EJ01050P)

物質索引 (6件)： FAD ,  キヌラミン ,  クロルギリン ,  セロトニン ,  フェネチルアミン ,  ベンジルアミン

タイトルに関連する用語 (7件)： ラット ,  モノアミンオキシダーゼA ,  MAO ,  Pichia ,  発現 ,  精製 ,  ヒト