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J-GLOBAL ID：201002291305787628   整理番号：10A0483553

Rhodococcusゲノムへの複数コピーDNAのランダム,一段階組込の新規ベクターの開発

New Vector System for Random, Single-Step Integration of Multiple Copies of DNA into the Rhodococcus Genome

著者 (6件)： SALLAM Khalid Ibrahim (Mansoura Univ., Mansoura, EGY) ,  TAMURA Noriko (National Inst. of Advanced Industrial Sci. and Technol. (AIST), Sapporo, JPN) ,  IMOTO Noriko (National Inst. of Advanced Industrial Sci. and Technol. (AIST), Sapporo, JPN) ,  IMOTO Noriko (Hokkaido Univ., Sapporo, JPN) ,  TAMURA Tomohiro (National Inst. of Advanced Industrial Sci. and Technol. (AIST), Sapporo, JPN) ,  TAMURA Tomohiro (Hokkaido Univ., Sapporo, JPN)
資料名： Applied and Environmental Microbiology  (Applied and Environmental Microbiology)
巻： 76  号： 8  ページ： 2531-2539  発行年： 2010年04月 
JST資料番号： A0427A  ISSN： 0099-2240  CODEN： AEMIDF  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： R.erythropolis JCM3201(野生株)のゲノム中に一段階で複数のDNA断片を組み込み,ランダム変異株ライブラリーを作成する新規トランスポゾン-ベクター系を開発した。宿主中で安定な2つのベクターpTip-istAB-sacBはトランスポザーセ(IstA)とそのヘルパー蛋白質(IstB)の発現を調節し,転移性マーカーDNAを遊離するpRTSK-sacBを同時に導入するとIstA/IstB発現の誘導後にのみマーカーDNAの転移が起きた。生成した変異株の30%に2~5コピーの挿入が起きていた。複数組込まれたDNAはゲノム中において淘汰圧なしで80世代以上安定に維持された。プロリンイミノペプチダーゼとビタミンD₃ヒドロキシラーゼの複数コピーを導入し,本系の有効性を評価し,1コピー組込酵素より強力活性子が産生することを認めた。

シソーラス用語： 微生物育種 ,  形質転換 ,  *ベクター ,  遺伝子ライブラリー ,  コピー数 ,  酵素生産 ,  *トランスポゾン ,  ペプチダーゼ ,  対供与体オキシゲナーゼ ,  バイオリアクタ ,  *Rhodococcus erythropolis ,  *ロドコッカス属 ,  *遺伝子 ,  *ゲノム ,  *微生物 ,  *放線菌目
準シソーラス用語： *Rhodococcus ,  ビタミンD₃ヒドロキシラーゼ ,  プロリンイミノペプチダーゼ

分類 (1件)： 遺伝子操作  (EC02050B)

タイトルに関連する用語 (8件)： Rhodococcus ,  ゲノム ,  コピー ,  DNA ,  段階 ,  組込 ,  ベクター ,  開発