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J-GLOBAL ID:201002294976453480   整理番号:10A0191847

Azotobacter vinelandii由来のニトロゲナーゼ転写活性化因子VnfAセンサリードメインにおけるFeSクラスターの役割

The role of the Fe-S cluster in the sensory domain of nitrogenase transcriptional activator VnfA from Azotobacter vinelandii
著者 (7件):
資料名:
巻: 277  号:ページ: 817-832  発行年: 2010年02月 
JST資料番号: B0206B  ISSN: 1742-464X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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Azotobacter vinelandiiの転写活性化因子VnfAをStrep-タグとタグ無し型蛋白質として大腸菌で産生し,精製した完全長VnfAの特性を詳細に調査した。in vivoおよびin vitroでの組換え型VnfAの分光・生化学的分析は,VnfA機能が補欠分子族として鉄硫黄(FeS)クラスター[Fe3S4]+を必要とすることを示した。また,VnfAがFeSクラスターの存在・非存在下で四量体を形成することを示唆した。FeSクラスターと再構成されたVnfAは,四量体につき4つの3Fe-4Sのクラスターを含有していた。in vivoでのβ-Galアッセイは,N末端システイン残基によりセンサーであるGAFドメインに固定されたFeSクラスターが,標的のニトロゲナーゼ遺伝子の転写を行うためにVnfAに必須であることを示した。さらにFeSクラスターには環境因子も作用し,NifAL系とは異なりO2はVnfAの転写活性に作用を示さないが,活性酸素種はFeSクラスター分解を引き起こし,機能的なVnfAを不活性化することを見出した。
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  土壌生物 

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