文献

J-GLOBAL ID：201002295818530865   整理番号：10A0238510

熱融解曲線を利用した酵素調製物の品質評価

Use of thermal melt curves to assess the quality of enzyme preparations

著者 (13件)： CROWTHER Gregory J. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  HE Panqing (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  RODENBOUGH Philip P. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  THOMAS Andrew P. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  KOVZUN Kuzma V. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  LEIBLY David J. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  BHANDARI Janhavi (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  CASTANEDA Lisa J. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  HOL Wim G.J. (Dep. of Biochemistry, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  GELB Michael H. (Dep. of Biochemistry, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  GELB Michael H. (Dep. of Chemistry, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  NAPULI Alberto J. (Dep. of Biochemistry, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA) ,  VAN VOORHIS Wesley C. (Dep. of Medicine, Univ. of Washington, Seattle, WA 98195, USA)
資料名： Analytical Biochemistry  (Analytical Biochemistry)
巻： 399  号： 2  ページ： 268-275  発行年： 2010年04月15日 
JST資料番号： H0177B  ISSN： 0003-2697  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 蛍光プローブと標準逆転写ポリメラーゼ連鎖反応(RT-PCR)機械を用いて簡単に得られる融解曲線から,酵素調製物の品質を測定できるかどうかを調べようとした。Plasmodium寄生虫の31種類の組換酵素に関する熱融解データを,90°Cまで徐々に加熱して,蛍光染料でアンフォールディングを測定することにより取得した。また,各酵素に特異的な活性分析を行った。4種類の酵素は,熱融解と活性分析前に熱とドデシル硫酸ナトリウムにより様々な度合いの変性を行った。一般的に,融解曲線の品質は酵素活性と相関して,高品質曲線の酵素はほとんど一様に活性であることが分かった,一方,低品質曲線の酵素は触媒性能がより変動した。ウシキサンチンオキシダーゼとEntamoena histolyticaシステインプロテアーゼ1の融解曲線検査は活性ストックを不活性ストックから識別することを可能にして,融解曲線品質と活性の関係が広範な実験条件と化学種を越えて持続されていることを暗示した。これらのデータは,融解曲線が正しい折り畳み蛋白質を変性蛋白質から識別するのを助けることができ,さらなる研究のストック選択と特定蛋白質の精製手順最適化における有用性を示唆した。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *酵素 ,  *状態図 ,  *酵素活性度 ,  組換タンパク質 ,  マラリア原虫 ,  キサンチンオキシダーゼ ,  システインプロテイナーゼ ,  温度依存性
準シソーラス用語： Plasmodium ,  システインプロテイナーゼ1 ,  蛋白質変性 ,  *融解曲線

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (3件)： 融解曲線 ,  酵素調製物 ,  品質評価