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J-GLOBAL ID：201002299111205432   整理番号：10A0145393

Aeropyrum pernix由来チミン-DNAグリコシラーゼの発現と特性解析

Expression and characterization of thymine-DNA glycosylase from Aeropyrum pernix

著者 (6件)： LIU Xi-peng (School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., 800 Dong-Chuan Road, Shanghai 200240, CHN) ,  LI Chun-peng (School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., 800 Dong-Chuan Road, Shanghai 200240, CHN) ,  HOU Jing-li (Instrumental Analysis Center, Shanghai Jiao Tong Univ., 800 Dong-Chuan Road, Shanghai 200240, CHN) ,  LIU Yu-fen (School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., 800 Dong-Chuan Road, Shanghai 200240, CHN) ,  LIANG Ru-bing (School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., 800 Dong-Chuan Road, Shanghai 200240, CHN) ,  LIU Jian-hua (School of Life Sciences and Biotechnology, Shanghai Jiao Tong Univ., 800 Dong-Chuan Road, Shanghai 200240, CHN)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 70  号： 1  ページ： 1-6  発行年： 2010年03月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Aeropyrum pernix(A.pernix)由来の組換えチミン-DNAグリコシラーゼ(TDG)を大腸菌で発現させた。基質としてチミン/ウラシル塩基を含んだオリゴヌクレオチドを使い,組換えA.pernix TDG(ApeTDG)の酵素活性特性を解析した。ApeTDGはT/Gミスマッチにはっきりとしたグリコシラーゼ活性を示した。チミン除去の至適温度およびpHはそれぞれ65~70°CおよびpH7.0~8.5であった。高濃度の塩化ナトリウムはチミン除去を阻害した。2価イオンは異なった影響をApeTDGによるチミン除去に及ぼした。Ca²⁺およびMg²⁺は酵素活性を阻害しなかったが,Ni²⁺,Co²⁺,Cu²⁺,Mn²⁺およびZn²⁺は切り出し反応を完全に阻害した。超好熱性古細菌由来の通りに,ApeTDG蛋白質は75°Cで耐熱性であった。ApeTDGはウラシル塩基にも比較的弱いDNAグリコシラーゼ活性を示し,次のような順序あった:U/C>U/G≒U/T>U/U≒U/I≒U/AP≒U/->U/A。T/Gの3′における付加的ミスマッチはT/Gの5′のミスマッチより弱い阻害をチミン除去に示し,T/Gの両側での2つの付加的ミスマッチはチミン切り出しを完全に阻害した。全体として,これらのデータからApeTDGは弱いUDG活性を有するTDG蛋白質であることを示唆した。Copyright 2010 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *細菌 ,  *DNAグリコシラーゼ ,  遺伝子発現 ,  大腸菌 ,  *基質特異性 ,  窒素複素環化合物 ,  オリゴヌクレオチド ,  酵素活性度 ,  不適正塩基対 ,  除去 ,  温度依存性 ,  pH依存性 ,  塩化ナトリウム ,  カルシウム ,  マグネシウム ,  ニッケル ,  コバルト ,  銅 ,  マンガン ,  亜鉛 ,  酵素阻害 ,  好熱性 ,  古細菌 ,  耐熱性 ,  ヌクレオチド配列 ,  濃度依存性 ,  ウレア化合物 ,  ヒドロキシ化合物
準シソーラス用語： *Aeropyrum pernix ,  ウラシルDNAグリコシラーゼ ,  *チミンDNAグリコシラーゼ

分類 (3件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

物質索引 (2件)： ウラシル ,  チミン

タイトルに関連する用語 (5件)： Aeropyrum ,  チミン ,  DNAグリコシラーゼ ,  発現 ,  特性解析