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J-GLOBAL ID:201102204263865108   整理番号:11A0931562

Bacillus pumilus(バチルス属)におけるアルカリプロテアーゼ遺伝子のランダム突然変異

Random Mutation of Alkaline Protease Gene in Bacillus pumilus
著者 (6件):
資料名:
巻: 16  号:ページ: 96-99  発行年: 2010年 
JST資料番号: W1511A  ISSN: 1006-687X  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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セリンプロテアーゼファミリー(S8A)に属すDe-hairアルカリプロテアーゼ(DHAP)は活性中心としてAsp32,His64,Ser221を持つ275アミノ酸残基から成り,ジスルフィド結合を持たない。Bacillus pumilus由来のDHAP遺伝子(NCBI No:AY458140)のランダム突然変異を修飾エラープローンPCRで行った。ランダム突然変異ライブラリーを大腸菌DH5aとB.subtilis WB600で構築した。ランダム突然変異ライブラリーの容量は4×105であった。三連続エラープローンPCRに続くスクリーニングの後,改善した特性を持つ期待した突然変異体pP43AP-M166が得られた。野生株と比べ,pP43AP-M166は異なるpH及び温度における活性及び安定性が改善された。更に,活性を測定し,その活性は最適反応条件である50°C,pH10で,野生株より1.23倍高く,優れた温度安定性を示した。遺伝子配列分析から,突然変異体の酵素はF62Cを持つことが示された。突然変異体AAの位置はHis64から分離したひとつのAAのみを持ち,触媒活性中心の最も重要な組成であった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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分類 (1件):
分類
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植物生態学 

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