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J-GLOBAL ID：201102205374081439   整理番号：11A0929511

結核菌(Mycobacterium tuberculosis)において差次的に発現する遺伝子に対する抑制的サブトラクションハイブリダイゼイションによるサブトラクションcDNAライブラリーの構築

Construction of subtracted cDNA library by suppression subtracted hybridization for differentially expressed genes in Mycobacterium tuberculosis

著者 (2件)： LIU Yan-Qun (Dep. of Respiratory Medicine,the Second Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing) ,  DU Xian-Zhi (Dep. of Respiratory Medicine,the Second Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing)
資料名： Zhongguo Mianyixue Zazhi  (Zhongguo Mianyixue Zazhi)
巻： 26  号： 1  ページ： 61-65  発行年： 2010年 
JST資料番号： C2268A  ISSN： 1000-484X  CODEN： ZMZAEE  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 目的:特別にMycobacterium tuberculosis H37Rv及びH37Ra遺伝子を分離し,抑制的サブトラクションのハイブリダイゼイションによって2つのcDNAライブラリー(SSH)を構築する。方法:Mycobacterium tuberculosisの病原性株H37Rvと弱毒化株H37Ra間の差次的なゲノム遺伝子をクローニングするのに抑制的サブトラクションハイブリダイゼイション法(SSH)を用いた。2回のサブトラクションハイブリダイゼイション及び2回のPCRの後,最後のPCR増幅産物をpGEM-T Easyベクターに挿入し,E coli DH5αにトランスフォームし,形質転換体の青色と白色のコロニーをスクリーニングした。差次的に発現したサブトラクションcDNAライブラリーは,RT-PCR法によって同定した。結果:テスターとして高度にあるいは特別に発現した遺伝子は,正反応(テスターとしてH37Rv)及び逆反応(テスターとしてH37Ra)においてSSHによって得られた。Mycobacterium tuberculosis H37Rv及びH37RaのA及びBのライブラリーの構築に成功した。90%のコロニーは白色コロニーであり,コロニーの単一バンドは75%と80%であった。結論:Mycobacterium tuberculosis H37Rv及びH37RaのcDNAライブラリーをSSH手法によって構築できた。これらの中で新規で特異的な差次的に発現した遺伝子のスクリーニング及びクローニングのためのコンピュータ基礎になった。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *結核菌 ,  *遺伝子クローニング ,  分子ハイブリダイゼーション ,  遺伝子ライブラリー ,  病原性 ,  PCR法 ,  大腸菌
準シソーラス用語： cDNAライブラリー ,  サブトラクション法

分類 (2件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  微生物生理一般  (EG03051L)

タイトルに関連する用語 (7件)： 結核菌 ,  Mycobacterium ,  発現 ,  遺伝子 ,  サブトラクション ,  cDNAライブラリー ,  構築