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J-GLOBAL ID：201102209984573487   整理番号：11A1691347

遺伝子組み換えヒトαA-クリスタリン蛋白質中での3種の特異なアスパルチル残基のβ-結合異性化の速度定数の逆相HPLCによる決定

Determination of rate constants for β-linkage isomerization of three specific aspartyl residues in recombinant human αA-crystallin protein by reversed-phase HPLC

著者 (3件)： SADAKANE Yutaka (Fac. of Pharmaceutical Sciences, Suzuka Univ. of Medical Sci., Suzuka Mie 513-8670, JPN) ,  FUJII Noriko (Res. Reactor Inst., Fac. of Sci., Kyoto Univ., Kumatori, Sennan, Osaka 590-0494, JPN) ,  NAKAGOMI Kazuya (School of Pharmaceutical Sciences, Teikyo Univ., Kanagawa 199-0195, JPN)
資料名： Journal of Chromatography B  (Journal of Chromatography B)
巻： 879  号： 29  ページ： 3240-3246  発行年： 2011年11月01日 
JST資料番号： W0571A  ISSN： 1570-0232  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 主要な可溶性眼レンズ蛋白質,αA-クリスタリンは,非常に長い半減期を持つ。したがって,立体反転を含む多くの翻訳後修飾がその構成アミノ酸中で見出された。筆者らは,ヒトαA-クリスタリン蛋白質の特異なAsp残基のスクシンイミド形成反応が主であるβ-結合異性化の反応速度を単純なRP-HPLC法によって決定する。β-結合異性化の反応速度論的解析を,⁵⁸Aspと¹⁵¹Aspの残基の両方のD/L比が,高齢のヒトの眼レンズから単離されたαA-クリスタリン中の1.0よりも大きいので,αA-クリスタリンの3つのAsp残基,⁵⁸Asp,⁸⁴Asp,及び¹⁵¹Aspで行った。⁵⁸Asp,⁸⁴Asp残基の両方の50°C以下でのβ-結合異性化が,合成ペプチド中でのそれと比べて約0.4-0.5倍抑制されるのに対し,¹⁵¹Aspの異性化は,全蛋白質と合成断片的ペプチドと同じ速度で起きた。αA-クリスタリン蛋白質を高温でインキュベートするとき,⁵⁸Aspの遺伝子組み換え蛋白質中での異性化の抑制が緩和された。遠紫外CDスペクトルは,蛋白質の2次構造が,組み替えαA-クリスタリン蛋白質中の60°C以上の高温で部分的無秩序構造をとることを示した。これらの結果は,⁵⁸Asp残基がαA-クリスタリン蛋白質の高次構造によってスクシンイミド中間体形成から抑制され,αA-クリスタリンの⁵⁸Asp残基周辺の構造環境がスクシンイミド形成の関連で合成断片的ペプチドのそれと類似することを示唆する。αA-クリスタリン蛋白質の2次構造の影響の差異が,組み替え蛋白質中の⁵⁸Aspと¹⁵¹Asp残基のスクシンイミド形成の順序を合成断片的ペプチドでの順序と比べて逆転させる。Copyright 2011 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *クリスタリン ,  *ヒト ,  *異性化 ,  *定数 ,  *逆相HPLC ,  半減期 ,  翻訳後修飾 ,  *アミノ酸残基 ,  温度依存性 ,  円偏光二色スペクトル ,  二次構造 ,  ジアステレオマ ,  脂肪族カルボン酸 ,  酸イミド ,  ジカルボン酸 ,  *αAクリスタリン ,  *アスパラギン酸残基 ,  *速度定数 ,  *遺伝的組換え
準シソーラス用語： *組換 ,  *遺伝子組換

分類 (2件)： 有機化合物のクロマトグラフィー,電気泳動分析  (CC04034H) ,  蛋白質・ペプチド一般  (EB03010N)

物質索引 (1件)： スクシンイミド

タイトルに関連する用語 (8件)： 遺伝子組み換え ,  ヒト ,  αA-クリスタリン ,  蛋白質 ,  残基 ,  異性化 ,  速度定数 ,  逆相HPLC