CD44変異型はヒト乳癌MCF-7細胞の侵襲性能力を増大する

FANG Xin-jian; XU Wen-lin; GONG Jin-ling; CHEN Chen; FANG Li-li; CHEN Qiao-yun

文献

J-GLOBAL ID：201102213584885460 整理番号：11A0928526

CD44変異型はヒト乳癌MCF-7細胞の侵襲性能力を増大する

CD44 variant increases the invasive ability of human breast cancer cell line MCF-7 cells

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資料名：
巻： 32 号： 1 ページ： 22-28 発行年： 2010年
JST資料番号： C2345A ISSN： 0253-3766 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：中国 (CHN) 言語：中国語 (ZH)

目的ヒト乳癌MCF-7細胞の侵襲におけるCD44新変異型の影響とメカニズムを評価する。方法 MCF-7/ADR細胞からRT-PCRにより分離した全RNAからCD44vl7をコードする完全長cDNAを得て,pMD19-Tベクターにサブクローニングした。CD44vl7遺伝子配列と解読枠は,2つの制限酵素とヌクレオチド配列および,真核細胞発現ベクターpcDNA3.1への挿入により確認した。pcDNA3.l-CD44vl7は,リポフェクタミンによりMCF-7細胞に移入した。MMP-2とMMP-9発現変化は,RT-PCRとゼラチンザイモグラフィーで検知した。各群の人工基質膜を通過する細胞数を計測してCD44変異型による侵襲性能力制御変化を比較した。ERKとp-ERKは,ウェスタンブロット法によりCD44変異型により制御されたMMP-2とMMP-9発現の分子メカニズムを検討した。結果新しい遺伝子配列を組み換えベクターpcDNA3.1にクローン化し,制限酵素により確認した。構築されたプラスミドはCD44遺伝子変異型を持ち,それは1to4エキソン,16to17エキソン,1to205塩基の18エキソンから成っていた。新しい遺伝子配列は発刊のためNCB1に送付され,登録番号FJ216964を得た。pcDNA3l-CD44vl7移送を受けたMCF-7細胞でのCD44遺伝子mRNAと蛋白のアップレギュレーションレベルは,RT-PCRとフローサイトメトリーにより測定した。細胞の浸潤能とMMP-2およびMMP-9活性は,ヒアルロン酸(HA)処理により明らかに活性化され,CD44中和抗体によりブロックされた。MCF-7/CD44vl7細胞は中和抗体前処理により,MAPKsシグナル伝達経路抑制剤はp-ERK発現を強力にブロック・・・Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

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基礎腫よう学一般 , 遺伝子操作

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