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J-GLOBAL ID：201102232387597482   整理番号：10A0477980

Helicobacter pyloriの尿素チャンネル蛋白質(Urel)遺伝子エンコードに対する真核生物ベクターの構造及び発現とその抗原性

Construction and expression of the eukaryotic vector for the gene encoding the urea channel protein(Urel) of Helicobacter pylori and investigation on its antigenicity

著者 (6件)： ZHOU Jing (Dep. of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing) ,  YANG Li-juan (Dep. of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing) ,  YUAN Yuan (Dep. of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing) ,  XIANG Ting-xiu (Dep. of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing) ,  JIANG Zheng (Dep. of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing) ,  WANG Pi-long (Dep. of Gastroenterology,The First Affiliated Hospital,Chongqing Medical Univ., Chongqing)
資料名： Zhongguo Renshougonghuanbing Xuebao  (Zhongguo Renshougonghuanbing Xuebao)
巻： 25  号： 4  ページ： 313-317  発行年： 2009年 
JST資料番号： C2253A  ISSN： 1002-2694  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 遺伝子エンコードに対する真核生物ベクターを作成し,核酸ワクチンを開発する基礎を提供するために,COS-7細胞で発現した。この対象下で,真核生物発現プラスミドpET32a(+)/UreIはテンプレートとして使用し,標的遺伝子をエンコードするUrel蛋白質はこのプラスミドから増幅し,Hind MとKpn Iで消化した。同様に,プラスミドpEGFP-N1は,同時にこれらの2つのエンドヌクレアーゼでも消化した。それから,客観的な遺伝子とプラスミドpEGFP-Nlは,ゲルキットで精製し,4:1モル率にT4リガーゼによって結合した。組換えベクターpEGFP-N1/Uralは,COS-7細胞における,選択,変形,持続発現で用いた。一方,COS-7細胞でのこの真核生物ベクターの発現は,蛍光顕微鏡検査法とウエスタンブロット法を使用して調査した。制限エンドヌクレアーゼ分析と配列決定によって,挿入した標的遺伝子フラグメントのサイズが585bpsであることが判明した。そして,この遺伝子フラグメントは,Ural蛋白質をコード化している遺伝子であることを証明した。GenBankによって報告されるH.pylori AM417609の遺伝子と比較して,クローンしたurel遺伝子配列は完全に一致した。COS-7の組換えベクターpEGFP-N1/Urelの発現は蛍光顕微鏡検査法によって検出し,この微生物に感染した患者の抗H.pylori抗体によって確認し,この蛋白質が優れた生物活性を持つことが示唆された。組換え型真核生物ベクターpEGFP/Urelは作成されて,COS-7細胞で持続して発現した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： Helicobacter pylori ,  *ベクター ,  蛍光顕微鏡 ,  ウェスタンブロット法 ,  免疫原性 ,  ヌクレオチド配列 ,  COS細胞 ,  *遺伝子発現 ,  生物活性 ,  タンパク質
準シソーラス用語： 発現ベクター ,  抗原性 ,  COS-7細胞

分類 (3件)： 遺伝子発現  (EC02040Q) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J) ,  免疫療法薬・血液製剤の基礎研究  (GW22010D)

タイトルに関連する用語 (10件)： Helicobacter ,  尿素 ,  チャンネル ,  蛋白質 ,  遺伝子 ,  エンコード ,  真核生物 ,  ベクター ,  発現 ,  抗原性