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J-GLOBAL ID：201102233391427903   整理番号：11A1001940

Pseudomonas fluorescens N3からクローニングしたトランス-O-ヒドロキシベンジリデンピルビン酸ヒドラターゼ-アルドラーゼ(tHBP-HA)のアルドール縮合活性の特性解析

Characterization of the aldol condensation activity of the trans-o-hydroxybenzylidenepyruvate hydratase-aldolase (tHBP-HA) cloned from Pseudomonas fluorescens N3

著者 (4件)： FERRARA Silvia ,  MAPELLI Erika ,  SELLO Guido ,  DI GENNARO Patrizia
資料名： Biochimica et Biophysica Acta  (Biochimica et Biophysica Acta)
巻： 1814  号： 5  ページ： 622-629  発行年： 2011年05月 
JST資料番号： B0207A  ISSN： 0005-2728  CODEN： BBBMBS  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： トランス-O-ヒドロキシベンジリデンピルビン酸ヒドラターゼ-アルドラーゼ(tHBP-HA)をコードする遺伝子を,Pseudomonas fluorescensのナフタレン分解環境株N3から分離した。この酵素はピルビン酸とサリチルアルデヒドを遊離するトランス-O-ヒドロキシベンジリデンピルビン酸(t-HBP)の変換を可逆的に触媒するクラスIのアルドラーゼである。N末端にHis6タグを付けた38kDaの組換え蛋白質としてEscherichia coliでこの酵素を発現させた。組換え蛋白質His-tHBP-HAをアフィニティクロマトグラフィーで精製し,アルドール縮合反応での活性の生化学的特性解析をここに示した。アルドール縮合反応パラメータをナフタレン分解経路に使われている天然基質であるサリチルアルデヒドと,ベンズアルデヒドの両方をアクセプターとして使って測定した。いずれの場合でも,His-tHBP-HAは同様な見かけ上のK_mと見かけ上のV_max値を示した。His-tHBP-HA活性の至適pHと温度はそれぞれ7.0と30°Cであることがさらなる解析で示された。大量の精製蛋白質を生産するためのtHBP-HA触媒反応速度と効率的な系の利用能はバイオテクノロジーの観点から関連していた。Copyright 2011 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *蛍光菌 ,  遺伝子クローニング ,  *アルドラーゼ ,  *アルドール反応 ,  酵素活性度 ,  アフィニティー標識 ,  組換タンパク質 ,  大腸菌 ,  遺伝子発現 ,  アフィニティークロマトグラフィー ,  精製 ,  芳香族縮合炭化水素 ,  芳香族アルデヒド ,  Michaelis定数 ,  pH依存性 ,  温度依存性 ,  反応経路 ,  フェノール類 ,  ヒスチジン標識 ,  *微生物 ,  分子遺伝現象 ,  化学分析 ,  解析 ,  分析 ,  生化学的分析 ,  ポリアセン
準シソーラス用語： *アルドール縮合 ,  *トランス-O-ヒドロキシベンジリデンピルビン酸ヒドラターゼ-アルドラーゼ ,  ヒスチジンタグ

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B)

物質索引 (4件)： (E)-2-オキソ-4-(2-ヒドロキシフェニル)-3-ブテン酸 ,  サリチルアルデヒド ,  ナフタレン ,  ベンズアルデヒド

タイトルに関連する用語 (10件)： Pseudomonas ,  クローニング ,  トランス ,  酸 ,  ヒドラターゼ ,  アルドラーゼ ,  HA ,  アルドール縮合 ,  活性 ,  特性解析