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J-GLOBAL ID:201102255010020032   整理番号:11A1691348

光学分割によるD-アミノ酸の産生に有用なAlcaligenesのD-アミノアシラーゼの基質特異性のエンジニアリング

Engineering the substrate specificity of Alcaligenes d-aminoacylase useful for the production of d-amino acids by optical resolution
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巻: 879  号: 29  ページ: 3247-3252  発行年: 2011年11月01日 
JST資料番号: W0571A  ISSN: 1570-0232  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: オランダ (NLD)  言語: 英語 (EN)
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Alcaligenes xylosoxydans subsp.xylosoxydans A-6(AxD-NAase)由来のD-アミノアシラーゼは,N-アシル-DL-アミノ酸のラセミ混合物の産生などの新規なバイオテクノロジー応用を提供する。しかし,その基質特異性が,一定のアミノ酸に偏る。野生型のそれとは異なる基質特異性を有する突然変異体AxD-NAaseを作成するために,AxD-NAaseの基質認識サイトを計算化学,及び基質特異性を有する他のD-アミノアシラーゼの1次構造の比較に基づいて合理的にコントロールした。アミノ酸残基の突然変異体,Phe191,Leu298,Tyr344,及びMet346が,基質の側鎖と相互作用し,それぞれの基質に対する活性に顕著な変化を誘導した。例えば,突然変異体のPhe191のN-アセチル-D-trpとN-アセチルD-Alaに対する触媒効率(kcat/Km)は,野生型と比べてそれぞれ15.6倍と1.5倍増強した。突然変異体のLeu298のN-アセチル-D-trpに対する触媒効率(kcat/Km)は,野生型と比べて4.4倍増強した。これらの突然変異体の他の酵素特性(pHと温度依存性など)は,野生型と同じであった。特に,F191W突然変異体が,治療薬剤の重要なビルディングブロックであるD-trpの酵素合成に有用であった。Copyright 2011 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (2件):
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有機化合物の物理分析  ,  蛋白質・ペプチド一般 

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