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J-GLOBAL ID：201102261088003738   整理番号：11A1044877

神経突起伸長抑制性66真核細胞発現ベクターの構築と選別

CONSTRUCTION AND SCREENING OF NEURITE OUTGROWTH INHIBITORY 66 EUKARYOTIC EXPRESSION VECTORS

著者 (7件)： LI Ruofei (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an) ,  DANG Xiaoqian (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an) ,  LI Jianwei (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an) ,  WANG Kunzheng (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an) ,  BAI Chuanyi (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an) ,  BAO Lizhong (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an) ,  LOU Gaojie (Dep. of Orthopedics,the Second Affiliated Hospital,School of Medicine,Xi’an Jiaotong Univ., Shaanxi, Xi’an)
資料名： Zhongguo Xiufu Chongjian Waike Zazhi  (Zhongguo Xiufu Chongjian Waike Zazhi)
巻： 24  号： 2  ページ： 185-189  発行年： 2010年 
JST資料番号： W1493A  ISSN： 1002-1892  CODEN： ZXCZEH  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】神経突起伸長抑制性66-低分子干渉RNA(nogo66-siRNA)真核細胞発現ベクターの構築と選別を行い,干渉効率の良い関連ウイルス性ベクター再構築のための基礎データを得る。【方法】nogo66-siRNAフラグメントを設計し,クローン化して,pGenesil-1.1とし,4種のプラスミド(pGenesil-nogo66-siRNA-1,pGenesil-nogo66-siRNA-2,pGenesil-nogo66-siRNA-hkとpGenesil-nogo66-siRNA-kb)を得た。配列を確認し,C6セルラインに移入した。蛍光顕微鏡法で移入効率を測定した。RT-PCR法とウェスタンブロッティング法によりnogo遺伝子発現を調べ,干渉効率の良いプラスミドを選別した。【結果】DNA配列決定結果から,干渉配列が正しいことを確認できた。pGenesil-nogo66-siRNAをKpn I/Xho Iで消化して,800bpと4.3kbのバンドを検出した。蛍光顕微鏡法で緑色蛍光蛋白発現を確認できた。移入効率は約73%であった。RT-PCR法とウェスタンブロッティング法の結果,pGenesil-nogo66-siRNA-1の移入により,nogo遺伝子発現が非移入細胞の22%に減少し,nogo蛋白発現は73%に減少した。また,pGenesil-nogo66-siRNA-2の移入では,nogo遺伝子発現が非移入細胞の28%に減少し,nogo蛋白発現は78%に減少した。減少率には有意差があった(P<0.05)。pGenesil-nogo66-siRNA-hkおよびpGenesil-nogo66-siRNA-kbの移入ではnogo遺伝子発現もnogo蛋白発現も有意な減少がなかった(P>0.05)。【結論】nogo66-siRNA真核細胞発現ベクター構築に成功し,脊髄損傷修復の実験的基礎データが得られた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *形態形成 ,  *成長 ,  真核細胞 ,  ベクター ,  siRNA ,  ウイルス ,  脊髄損傷 ,  光学顕微鏡法 ,  RT-PCR法
準シソーラス用語： *神経突起伸長 ,  発現ベクター ,  低分子干渉RNA ,  蛍光顕微鏡法

分類 (1件)： 神経の基礎医学  (GN01020W)

タイトルに関連する用語 (5件)： 神経突起伸長 ,  真核細胞 ,  発現ベクター ,  構築 ,  選別