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J-GLOBAL ID：201102264027137862   整理番号：11A1305076

カルレティキュリン-HBsAg癒合遺伝子組換え型アデノウイルス発現ベクタの構成と特性評価

Construction and characterization of calreticulin-HBsAg fusion gene recombinant adenovirus expression vector

著者 (4件)： Ma Chunling (Immunology Lab. of Shandong Medical Coll., Shandong, Linyi) ,  Wang Guibin (Imaging Div., Renmin Hospital of Linyi City, Shandong, Linyi) ,  Gu Runguo (Immunology Lab. of Shandong Medical Coll., Shandong, Linyi) ,  Fang Wang (Dep. of Lab. Medicine, the First Affiliated Hospital of Nanjing Medical Univ., Jiangsu, Nanjing)
資料名： World Journal of Gastroenterology  (World Journal of Gastroenterology)
巻： 16  号： 24  ページ： 3078-3082  発行年： 2010年 
JST資料番号： C2580A  ISSN： 1007-9327  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 【目標】:安全で,効果的で,HBsAg特異な治療の痘瘡ワクチンを開発するためにカルレティキュリン(CRT)-HBs抗原(HBsAg)癒合遺伝子を含む組換え型アデノウイルスベクターを生じること。【方法】:CRTとHBsAg遺伝子は,ポリメラーゼ連鎖反応(PCR),エンドヌクレアーゼ消化と結紮方式を用いて溶解した。DNA(CaCC)配列の塩基対を5’末端に加えた後に,癒合遺伝子は,pENTR/D-TOPO転移ベクターにクローン化した。CRT-HBsAg癒合遺伝子を含むアデノウイルス発現ベクターは,相同組換えによって構成した。ヒト胚腎臓(HEK)293A細胞は,パッケージして,組換え型アデノウイルスを増幅するために,組換え型アデノウイルスベクターの線状DNAプラスミドによって形質移入した。組換え型アデノウイルス滴定量は,末端-希釈検査を用いて特性評価した。Ad-CRT/HBsAg感染性293A細胞におけるCRT/HBsAg融合蛋白質発現は,ウェスタンブロット法によって検出した。【結果】:CRT-HBsAg癒合遺伝子は,PCR法と配列解析によって特性評価して,その長さと配列は正確であることを確認した。CRT-HBsAg癒合遺伝子組換え型pENTR/D-TOPO転移ベクターを構成した。組換え型アデノウイルスベクター(Ad-CRT/HBsAg)は,成功して生じた。Ad-CRT/HBsAgの滴定量は,3.9×1011pfu/mLとして特性評価した。CRT-HBsAg融合蛋白質は,適切にHEK293A細胞によって表現した。【結語】:CRT/HBsAg癒合遺伝子組換え型複製-欠陥品アデノウイルス発現ベクタは,成功して構成して,本研究はB型肝炎ウイルス遺伝子治療の更なる研究のために実験的基礎を提供した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *カルシウム結合タンパク質 ,  アデノウイルス科 ,  組換 ,  キャラクタリゼーション ,  ベクター ,  癒着 ,  発生
準シソーラス用語： *カルレチクリン ,  アデノウイルス ,  遺伝子組換 ,  特性評価 ,  癒合 ,  発現

分類 (1件)： 消化器の腫よう  (GH04000D)

タイトルに関連する用語 (8件)： カルレティキュリン ,  HBsAg ,  癒合 ,  遺伝子 ,  組換え型アデノウイルス ,  発現 ,  ベクタ ,  特性評価