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J-GLOBAL ID：201102270219075070   整理番号：11A1071197

乳酸デヒドロゲナーゼとピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ発現を減少することによってCHO細胞で乳酸レベルを減少し,抗体生産を増加する

Decreasing lactate level and increasing antibody production in Chinese Hamster Ovary cells (CHO) by reducing the expression of lactate dehydrogenase and pyruvate dehydrogenase kinases

著者 (12件)： ZHOU Meixia (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  CRAWFORD Yongping (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  NG Domingos (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  TUNG Jack (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  PYNN Abigail F.J. (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  MEIER Angela (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  YUK Inn H. (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  VIJAYASANKARAN Natarajan (Dep. of Late Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  LEACH Kimberly (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  JOLY John (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  SNEDECOR Bradley (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA) ,  SHEN Amy (Dep. of Early Stage Cell Culture, Genentech Inc., 1 DNA Way, South San Francisco, CA 94080, USA)
資料名： Journal of Biotechnology  (Journal of Biotechnology)
巻： 153  号： 1-2  ページ： 27-34  発行年： 2011年04月20日 
JST資料番号： A0456C  ISSN： 0168-1656  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： CHO細胞の大規模流加培養プロセスはモノクローナル抗体の臨床及び商業生産のための標準的プラットホームである。乳酸がCHO流加培養の主副産物の1つである。pH制御バイオリアクタでは,乳酸の高レベル蓄積が細胞培養培地pHを制御するための塩基添加に起因して高浸透圧を伴い,製造中の低い細胞増殖及び低い治療蛋白質生産を潜在的に引き起こす。乳酸デヒドロゲナーゼ(LDH)は基質,ピルビン酸の乳酸への変換を触媒する酵素であり,ピルビン酸濃度を含む多くの因子がLDH活性を変調する。交代に,ピルビン酸はクエン酸サイクルで代謝されるためにピルビン酸デヒドロゲナーゼ(PDH)によってアセチルCoAに変換される。ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ(PDHK)によってリン酸化されるとPDH活性が阻害された。ここでは,乳酸デヒドロゲナーゼA(LDHa)及びPDHKをノックダウンして乳酸代謝及び蛋白質生産に及ぼす影響を調べた。LHDa及びPDHKに対する小阻害RNA(siRNA)を持つ単一ターゲティングベクターを用いてLHDa及びPDHKが同時にダウンレギュレーションできることを見出した。さらに,siRNA仲介LHDa/PDHKノックダウンクローンを用いた流加振盪フラスコ評価データは治療モノクローナル抗体を発現するCHO細胞でのLHDa及びPDHKのダウンレギュレーションが細胞増殖に感知できる影響なしに乳酸生産を90%減少し,比生産性及び体積抗体生産をそれぞれ75%及び68%増加することを示した。siRNAクローンでの低い乳酸レベルと高抗体生産の類似傾向がバイオリアクタで行った評価でも平均して観察された。Copyright 2011 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *乳酸デヒドロゲナーゼ ,  *セリン/トレオニンキナーゼ ,  *CHO細胞 ,  *生産 ,  流加培養 ,  モノクローナル抗体 ,  副産物 ,  バイオリアクタ ,  浸透圧 ,  ピルビン酸デヒドロゲナーゼ ,  クエン酸サイクル ,  リン酸化 ,  ダウンレギュレーション ,  *siRNA ,  ターゲティング ,  細胞増殖 ,  遺伝子ターゲティング ,  ベクター ,  アシルCoA ,  脂肪族ケトン ,  脂肪族カルボン酸 ,  ケト酸 ,  脂肪族アルコール ,  第二アルコール ,  ヒドロキシ酸
準シソーラス用語： *ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ ,  遺伝子ノックダウン ,  *抗体生産 ,  振盪フラスコ培養 ,  単一ターゲティングベクター ,  乳酸デヒドロゲナーゼA

分類 (4件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  遺伝子操作  (EC02050B) ,  代謝と栄養  (EG03054K) ,  動物組織・細胞による物質生産  (FK03060S)

物質索引 (3件)： アセチルCoA ,  ピルビン酸 ,  乳酸

タイトルに関連する用語 (6件)： 乳酸デヒドロゲナーゼ ,  ピルビン酸デヒドロゲナーゼキナーゼ ,  発現 ,  CHO細胞 ,  乳酸 ,  抗体