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J-GLOBAL ID:201102274116313173   整理番号:11A1138770

レトロウイルスの転移と位置特異的組換による媒介ブタ肝細胞隔離と可逆的不死化

Porcine hepatocyte isolation and reversible immortalization mediated by retroviral transfer and site-specific recombination
著者 (10件):
資料名:
巻: 16  号: 13  ページ: 1660-1664  発行年: 2010年 
JST資料番号: C2580A  ISSN: 1007-9327  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 英語 (EN)
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【目標】:肝細胞細胞系統を開発するために,著者らはレトロウイルスのベクターSSR#69が,SV40ウイルスT抗原(SV40Tag)を含んで,原発性ブタ肝細胞を不滅にした。【方法】:著者らは,改良した4-ステップ逆行する灌流技術によって,ブタ肝細胞隔離の方式を最初に確立した。次に,ブタ肝細胞はSV40Tを表現するレトロウイルスのベクターSSR#69によって永久保存して,ハイグロマイシン-耐性遺伝子は,組換が目標とする対loxPによって側面に接した。拡張した細胞におけるSV40T cDNAは,Cre/LoxP位置特異的組換によって次に切除した。【結果】:高い生存度(97%)による合成肝細胞は,レトロウイルスのベクターSSR#69によって成功して永久保存した。永久保存クローンのひとつは,典型的モルフォロジー的出現(TJPH-1)を示して,クローン菌輪によって選択して,培養において拡大した。CreレコンビナーゼによるSV40T遺伝子の切除術の後,細胞は成長することを止めた。戻った細胞の母集団は,区別した肝細胞特性を示した。【結語】:結論において,ここで著者らは肝細胞隔離の改良方式を説明して,細胞系統がレトロウイルスの転移と位置特異的組換によって媒介したブタ肝細胞を次に確立した。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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分類 (1件):
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消化器の基礎医学 

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