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J-GLOBAL ID:201102281037098964   整理番号:11A1271203

上流の遺伝子形質発現に及ぼす2種類のSV40ポリ(A)シグナルの影響

Influence of two kinds of SV40 poly (A) signals on upstream gene expression
著者 (5件):
資料名:
巻: 31  号:ページ: 630-633  発行年: 2010年 
JST資料番号: C2220A  ISSN: 0258-879X  CODEN: DJXUE5  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】ベクターのポリ(A)の選択の理論的な根拠を提供するために,3つの細胞系で上流遺伝子形質発現に関する2種類のSV40ポリ(A)シグナルの調整効果を調査する。【方法】二重ルシフェラーゼ・リポーター・ベクター二重Lucを構築し,2つのSV40ポリ(A)シグナル配列を個別にR-Luc遺伝子で下流のものに挿入した。それから,2つの多様な二重ルシフェラーゼレポーター遺伝子ベクター二重Luc2および二重Luc3を,293,L-02およびヒーラ細胞にトランスフェクションした。遺伝子(R-Luc)を抑制する標的遺伝子(F-Luc)の相対的な量は,二重GloTMルシフェラーゼ評価システムおよび逆のポリメラーゼ連鎖反応法(RT-PCR法)で測定した。【結果】2つの二重ルシフェラーゼ・ベクター(二重Luc2および二重Luc3)を,うまく構築した。二重Glo-TMルシフェラーゼアッセイは,以下を示した。F-Luc/R-Lucの平均値は,二重Luc2および二重Luc3トランスフェクションした293細胞において3.25±0.43および3.03±0.14であり(P<0.05),L-02細胞において6.16±0.39および3.83±0.39であり(P<>0.05),そして,ヒーラ細胞において1.21±0.10および0.66±0.02であった(P>0.05)。RT-PCR法の結果は,ルシフェラーゼアッセイの結果と合致した。【結論】SV40ポリ(A)シグナルの2つの種類は,種々の細胞系で上流の遺伝子形質発現に関し種々の調整効果を及ぼす。SV40ポリ(A)シグナルは,転写期では上流の遺伝子形質発現を制御する。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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