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J-GLOBAL ID：201102292490945246   整理番号：11A0919088

in vitroにおけるプロテアソーム活性因子REGγの組換え発現および機能に関する予備試験

A preliminary study on recombinant expression and function in vitro of proteasome activator REGγ

著者 (4件)： WU Min (Lab. of Molecular Biology, Anhui Medical Univ., Anhui, Hefei) ,  NIE Jing (Beijing Inst. of Radiation Medicine, Beijing) ,  ZHANG Ling-qiang (Lab. of Molecular Biology, Anhui Medical Univ., Anhui, Hefei) ,  WANG Yuan (Lab. of Molecular Biology, Anhui Medical Univ., Anhui, Hefei)
資料名： Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan  (Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan)
巻： 34  号： 1  ページ： 5-7,11  発行年： 2010年 
JST資料番号： C2452A  ISSN： 1000-5501  CODEN： JYKYEL  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】in vitroにおいて,遺伝子組換え技術を用いて,結合したプロテアソーム活性化因子REGγ(11S調節複合体γサブユニット)発現を試験し,REGγとカゼインキナーゼ2結合タンパク質-1(CKIP-1)との間の相互作用をさらに研究する。【方法】まず,テンプレートとしてプラスミドpCMV-Myc-REGγを用いたPCRによりREGγの完全長cDNA断片を増幅し,E.coli BL21細胞に形質転換される前に原核生物発現ベクトルpGEX-4T-2にサブクローニングした。イソプロピル-β-D-チオガラクトシド(IPTG)によってタンパク質発現を誘導した。次に,超音波処理の後,SDS-PAGEおよびウェスタンブロッティングによってタンパク質発現をモニターした。最後に,GSTプルダウンアッセイは行って,in vitroでREGγとCKIP-1との間の相互作用を調べた。【結果】原核生物発現構築物pGEX-4T-2-REGγの生成は成功し,DNA塩基配列決定によって確認された。発現分析から,音波処理および遠心分離後に,GST-REGγタンパク質が容易に発現し,主に溶菌液上清中で単離されたことが明らかとなった。GSTプルダウンアッセイから,in vitroではREGγとCKIP-1との間に強力な相互作用があることがわかった。【結論】プロテアソーム活性化因子REGγはin vitroにおいて骨芽細胞形成CKIP-1の負の調節因子と相互作用することができ,本試験はその生理学的関連性の今後の調査に光を投げ掛けた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *プロテアソーム ,  組換 ,  カゼインキナーゼ ,  タンパク質 ,  骨芽細胞 ,  生理学 ,  相互作用 ,  処理
準シソーラス用語： 遺伝子組換 ,  カゼインキナーゼII ,  超音波処理

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (3件)： プロテアソーム ,  組換え発現 ,  試験