特許
J-GLOBAL ID:201103047353705482

蛋白質変異体の生産方法、蛋白質変異体ライブラリーの作製方法、および蛋白質変異体をコードするcDNAのライブラリーの作製方法

発明者:
出願人/特許権者:
公報種別:特許公報
出願番号(国際出願番号):特願平11-041538
公開番号(公開出願番号):特開2000-236880
特許番号:特許第3790810号
出願日: 1999年02月19日
公開日(公表日): 2000年09月05日
請求項(抜粋):
【請求項1】 蛋白質をコードするcDNAを環状プラスミドに組み込み、この環状プラスミドを10mM Mg+2存在下でDNaseI処理を37度、5分間以内の条件で処理して無作為な位置で切断し、一カ所のみで切断された切断部位に、Asn-X-Ser、Asn-X-Thr、Y-Thr-Pro-Z-Pro及びSer-Glyからなる群(X、Y及びZは任意のアミノ酸)から選ばれる少なくとも1つの糖鎖結合アミノ酸配列をコードするDNA断片を導入する際に、そのDNA断片として、(1)糖鎖結合アミノ酸配列をコードするDNAの5’末端側に3n個のヌクレオチドを、3’末端側に3n個のヌクレオチドを付加したDNA断片、(2)糖鎖結合アミノ酸配列をコードするDNAの5’末端側に3n+1個のヌクレオチドを、3’末端側に3n+2個のヌクレオチドを付加したDNA断片、(3)糖鎖結合アミノ酸配列をコードするDNAの5’末端側に3n+2個のヌクレオチドを、3’末端側に3n+1個のヌクレオチドを付加したDNA断片、の混合物(上記(1)〜(3)においてnは整数)を用いることにより、糖鎖結合部位のフレームがそれを導入される蛋白質のフレームと一致するクローンを取得できるようにすることを特徴とする、蛋白質の一次構造上の無作為な一カ所に糖鎖結合部位が導入された変異体をコードするcDNAのライブラリーを作製する方法。
IPC (6件):
C12P 21/02 ( 200 6.01) ,  C40B 50/06 ( 200 6.01) ,  C07K 14/475 ( 200 6.01) ,  C12N 5/10 ( 200 6.01) ,  C12N 15/09 ( 200 6.01) ,  C12R 1/91 ( 200 6.01)
FI (6件):
C12P 21/02 C ,  C40B 50/06 ,  C07K 14/475 ,  C12N 5/00 B ,  C12N 15/00 ZNA A ,  C12R 1:91

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