特許
J-GLOBAL ID：201103094651708239
Trp残基を有するペプチドの合成方法
発明者：
出願人/特許権者：
代理人 (6件)：
社本 一夫
, 増井 忠弐
, 小林 泰
, 千葉 昭男
, 富田 博行
, 松本 謙
公報種別：特許公報
出願番号（国際出願番号）：特願2002-552954
特許番号：特許第4064817号
出願日： 2001年12月19日
請求項（抜粋）：
【請求項1】 式:
pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2
で示されるペプチドの製造方法であって、
当該方法は:
(a)Boc-Glyのセシウム塩をクロロメチル化ポリスチレン樹脂に付着させ、Boc-Gly-樹脂を得ること;
(b)Boc-Gly-樹脂とBocを脱ブロック化する有機酸の混合物とを混合することによってBoc-Gly-樹脂を脱ブロック化し、H2N-Gly-樹脂の有機酸塩を得ること;
(c)H2N-Gly-樹脂の有機酸塩を塩基で中和し、H2N-Gly-樹脂を得ること;
(d)Boc-α-アミン保護されたプロリン、アルギニン、ロイシン、D-トリプトファン、チロシン、セリン、トリプトファン及びヒスチジン、並びにBoc-α-アミン保護されているか又はされていないピログルタミン酸を、この順にH2N-Gly-樹脂と連続的にカップリングすること、ここで、当該Boc-α-アミン保護トリプトファン及びD-トリプトファンは、その残基がさらにホルミル基で保護されており、当該Boc-α-アミン保護ヒスチジンは、その残基がトシル基でさらに保護されており、工程(d)は:
(i)ペプチドカップリング剤の存在下で、H2N-Gly-樹脂とBoc-α-アミン保護プロリンとを反応させ、Bocでブロック化されたカップリングされた生成物を得ること;
(ii)Bocでブロック化されたカップリングされた生成物と、Bocを脱ブロック化する有機酸とを混合することによって、Bocでブロック化されたカップリングされた生成物からBoc基を脱ブロック化し、カップリングした生成物を得ること;
(iii)ペプチドカップリング剤の存在下で、カップリングした生成物と、次のBoc-α-アミンで保護されたアミノ酸とを反応させ、Bocでブロック化されたカップリングされた生成物を得ること;
(iv)Bocでブロック化されたカップリングされた生成物と、Bocを脱ブロック化する有機酸とを混合することによって、Bocでブロック化されたカップリングされた生成物からBoc基を脱ブロック化し、次のカップリングした生成物を得ること;
(v)Boc-α-アミン保護ヒスチジンがカップリングされ、当該ヒスチジンのBoc基が脱ブロック化されて、カップリングされた生成物が得られるまで、工程(d)(iii)および(d)(iv)を繰り返し;
(vi)工程(v)のカップリング生成物とBoc基で保護された又は保護されていないピログルタミン酸とをペプチドカップリング剤の存在下で反応させ、Boc-保護ピログルタミン酸が用いられる場合には、Bocを脱ブロック化する有機酸と混合することによりピログルタミン酸のBoc基を脱ブロック化し;当該保護ヒスチジンのトシル側鎖保護基が除去されて保護された完成ペプチド-樹脂を得ることを含み;
(e)保護された完成ペプチド-樹脂を開裂および脱保護し、式:pGlu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2のペプチドを得ること、ここで前記開裂および脱保護する工程(e)は:
(i)アルコール/不活性な極性非プロトン性溶媒混合物の、保護された完成ペプチド-樹脂溶液を作製すること;
(ii)0°C〜10°Cに該溶液を冷却すること;
(iii)アンモニアガスまたはエチルアミンガスをゆっくりと泡立たせ、該溶液がアンモニアでよく飽和されるまで冷却し続け、飽和溶液を得ること:
(iv)95%を超える遊離メチルエステルが、アンモニアガスが用いられた場合、対応するアミドに変換されるまで、または、エチルアミンガスが用いられた場合、対応するエチルアミドに変換されるまで、冷却しないで該飽和溶液を15〜36時間混合することを含み;そして、
(f)前記溶液から前記ペプチドを単離すること、
の各工程を含む、前記ペプチドの製造方法。
IPC (5件)：
C07K 7/06 ( 200 6.01)
, C07K 7/23 ( 200 6.01)
, C07K 1/04 ( 200 6.01)
, C07K 1/06 ( 200 6.01)
, C07K 1/10 ( 200 6.01)
C07K 7/06 ZNA
, C07K 7/23
, C07K 1/04
, C07K 1/06
, C07K 1/10
