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J-GLOBAL ID：201202201472023732   整理番号：11A1995100

新規アデノウイルス-αウイルスハイブリッドベクター

A novel adenovirus-alphavirus hybrid vector

著者 (6件)： Li Zeliang (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  Wang Hua (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  Yang Yuefeng (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  Xiao Fengjun (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing) ,  Lu Zhuozhuang (Inst. for Viral Disease Prevention and Control, Chinese Center for Disease Prevention and Control, Beijing) ,  Wang Lisheng (Inst. of Radiation Medicine, Acad. of Military Medical Sciences, Beijing)
資料名： Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan  (Junshi Yixue Kexueyuan Yuankan)
巻： 34  号： 5  ページ： 406-411  発行年： 2010年 
JST資料番号： C2452A  ISSN： 1000-5501  CODEN： JYKYEL  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： 【目的】アデノウイルス-αウイルスハイブリッドベクターを構築し,造血細胞における導入遺伝子発現を増強する。【方法】主な実験手順に,バックボーンおよびハイブリッドシャットルプラスミドの構築,パッケージング細胞におけるハイブリッドウイルスの救出と伝播,および確立したベクターの遺伝子導入効率の評価が含まれた。オーバーラップ発現PCRを用い,pAdEasy/F11pのE4領域を部分的に検出し,新たなバックボーンプラスミドpAdEasy/F11pDE4orf3を生成した。造血細胞特異的プロモーター領域(CD11aプロモーター領域,CD11Ap),αウイルスベクター要素(nsP),標的遺伝子(GFP),およびポリAシグナル配列(pA)をpShuttleのマルチクローニングサイトに挿入し,ハイブリッドシャットルプラスミドpSh-SFV-GFPを構築した。E.coli BJ5183コンピテント細胞をpAdEasy/F11pDE4orf3および線形化pSh-SFV-GFPで同時形質転換し,相同組換によりハイブリッドウイルスプラスミドpAd5/F11p-SFV-GFPを作製した。ヘルパーウイルスプラスミドpAd5/f11p-HVを用いて線形化pAd5/F11p-SFV-GFPを293細胞にコトランスフェクトし,ハイブリッドウイルスAd5/F11p-SFV-GFPを救出した。293細胞で増殖させた後,CsCl密度勾配遠心でAd5/F11p-SFV-GFPを精製し,その後滴定した。U937細胞を100の感染多重度(MOI)でAd5/F11p-SFV-GFPまたは対照Ad5-GFPウイルスで感染させ,感染2日後にフローサイトメトリーでGFP発現を測定した。【結果】制限酵素消化およびシークエンシングにより,pAdEasy-1/F11p-E4orf3およびpSh-SFV-GFPプラスミドが確認された。ハイブリッドウイルスが首尾よく救出および精製され,3×1010IU/mlの力価に達した。Ad5-GFPまたはAd5/F11p-SFV-GFPに感染させたU937細胞のGFP陽性細胞は,それぞれ55.79%または2.42%であった。・・・Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *アデノウイルス科 ,  *αウイルス ,  *ベクター ,  細胞 ,  遺伝子発現 ,  遺伝子導入 ,  感染 ,  遺伝子 ,  シグナルペプチド
準シソーラス用語： *アデノウイルス ,  シグナル配列 ,  造血細胞 ,  導入遺伝子発現 ,  標的遺伝子

分類 (2件)： ウイルス学一般  (EG04010J) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (1件)： アデノウイルス