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J-GLOBAL ID：201202210042932762   整理番号：12A1067700

ヒトカスパーゼin vitro:発現,精製及び速度論的特性

Human caspases in vitro: Expression, purification and kinetic characterization

著者 (10件)： ROSCHITZKI-VOSER Heidi (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE) ,  SCHROEDER Thilo (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE) ,  LENHERR Esther D. (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE) ,  FROELICH Franziska (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE) ,  SCHWEIZER Andreas (Molecular Partners AG, Schlieren, CHE) ,  DONEPUDI Mrudula (Vertex Pharmaceuticals Inc., Cambridge, MA, USA) ,  GANESAN Rajkumar (MedImmune Inc., Gaithersburg, MD, USA) ,  MITTL Peer R.E. (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE) ,  BAICI Antonio (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE) ,  GRUETTER Markus G. (Univ. of Zuerich, Dep. of Biochemistry, Winterthurerstrasse 190, CH-8057 Zuerich, CHE)
資料名： Protein Expression and Purification  (Protein Expression and Purification)
巻： 84  号： 2  ページ： 236-246  発行年： 2012年08月 
JST資料番号： W0282A  ISSN： 1046-5928  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： オランダ (NLD)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： ヒトカスパーゼの発現,精製及び速度論的特性に対する多くの戦略やプロトコルが文献に記載されている。これらのプロトコルを系統的に修正し,カスパーゼ1から9に対する包括的な最適発現及び精製プロトコルを示し,同時に再現性のある速度論的特性に対する測定条件を改善した。活性部位滴定における研究から,再現性は測定バッファー中のDTTの存在で強く影響されることが示された。更に,全てのカスパーゼが酵素活性と蛋白質濃度との間に直線関係があるわけでないことが示され,これが異なる実験室からの比活性の公表値間の不一致を明らかにした。蛋白質濃度に対するカスパーゼ活性の依存度は濃度依存的二量化の影響であり,又コスモトロピックな塩にも影響されることが広範な速度論分析からの結論であった。本研究の結果としてのプロトコル推奨はヒトカスパーゼの発現及び精製に関する高い再現性を生み,酵素速度論データの標準化に貢献するであろう。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： ヒト ,  *カスパーゼ ,  遺伝子発現 ,  精製 ,  再現性 ,  酵素反応速度論 ,  酵素活性度 ,  濃度依存性 ,  二量化
準シソーラス用語： 蛋白質精製 ,  比活性

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

タイトルに関連する用語 (5件)： ヒト ,  カスパーゼ ,  発現 ,  精製 ,  速度論