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J-GLOBAL ID：201202213377012632   整理番号：12A1037770

新しい熱細胞直接RT-PCR法によるマイクロチャンバー内の単離単細胞における発現遺伝子の検出

Detection of expressed gene in isolated single cells in microchambers by a novel hot cell-direct RT-PCR method

著者 (6件)： FURUTANI Shunsuke (Soka Univ., Tokyo, JPN) ,  FURUTANI Shunsuke (Japan Soc. Promotion of Sci.(JSPS), Tokyo, JPN) ,  NAGAI Hidenori (National Inst. Advanced Industrial Sci. and Technol.(AIST), Osaka, JPN) ,  TAKAMURA Yuzuru (Japan Advanced Inst. Sci. and Technol.(JAIST), Ishikawa, JPN) ,  AOYAMA Yuri (Soka Univ., Tokyo, JPN) ,  KUBO Izumi (Soka Univ., Tokyo, JPN)
資料名： Analyst  (Analyst)
巻： 137  号： 13  ページ： 2951-2957  発行年： 2012年07月07日 
JST資料番号： A0392A  ISSN： 0003-2654  CODEN： ANALAO  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： イギリス (GBR)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 試薬を添加せずに加熱のみで同一反応チャンバーでの細胞リシス及びRT-PCR可能にする熱細胞直接RT-PCRを開発した。マンガンイオン存在下で高い逆転写活性を有する熱安定性Tth DNAポリメラーゼを利用し,二重染料蛍光プローブを用いた蛍光検出によってRT-PCR生成物を直接検出した。提案アプローチによってマイクロ流体デバイスで単離したJurkat細胞中のグリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ(GAPDH)遺伝子のmRNAを検出した。その結果,細胞を含むチャンバー数と10~400細胞/μLRT-PCR生成物を含むものとの間に線形相関(r=0.9933)を見いだすことができた。

シソーラス用語： *RT-PCR法 ,  マンガン化合物 ,  金属イオン ,  逆転写 ,  DNAポリメラーゼ ,  熱安定性 ,  流体素子 ,  Jurkat細胞 ,  グリセルアルデヒドリン酸デヒドロゲナーゼ ,  mRNA ,  細胞 ,  加熱 ,  プローブ ,  *蛍光分析 ,  *遺伝子発現 ,  鑑別 ,  マイクロ流体デバイス
準シソーラス用語： グリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ ,  マンガンイオン ,  蛍光プローブ

分類 (2件)： 分光分析  (CC03012W) ,  分子遺伝学一般  (EC02010J)

タイトルに関連する用語 (7件)： 細胞 ,  RT-PCR法 ,  チャンバー ,  単離 ,  単細胞 ,  発現 ,  遺伝子