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J-GLOBAL ID：201202217290360990   整理番号：12A1022360

化学ルミネセンス検出を用いた多重イメージキャピラリー等電点分画イムノアッセイによるモノクローナル抗体の電荷不均一性

Charge Heterogeneity of Monoclonal Antibodies by Multiplexed Imaged Capillary Isoelectric Focusing Immunoassay with Chemiluminescence Detection

著者 (5件)： MICHELS David A. (Genentech, California, USA) ,  TU Andrea W. (ProteinSimple, California, USA) ,  MCELROY Will (Genentech, California, USA) ,  VOEHRINGER David (ProteinSimple, California, USA) ,  SALAS-SOLANO Oscar (Seattle Genetics, Inc., Washington, USA)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 84  号： 12  ページ： 5380-5386  発行年： 2012年06月19日 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： モノクローナル抗体生成物の電荷不均一性分析に多重キャピラリー等電点分画イムノアッセイを適用した。組換モノクローナル抗体の製造工程は治療用薬物の純度に影響を及ぼす多重段階からなるもので,その工程での純度を決定し,化学物質及び翻訳後修飾を検出し,そして長期貯蔵安定性を決定するためには,それらのサイズまたは電荷のいずれかによって製品変異体を特性化できる分析ツールが必要である。ことに生物薬剤産業においてサイズ及び電荷不均一性などの純度特性のモニタリングに適した分析ツールの開発が必要とされていることから,本研究ではモノクローナル抗体の相対的な電荷分布を測定するためにNanoPro技法を適用した。このNanoPro技法は,全キャピラリーについて化学ルミネセンス検出を用いる,蛋白質リン酸化によって細胞信号解析を最適化した感度の良いアレイ12からなるキャピラリーイムノアッセイである。等電点分画後に,短い被覆キャピラリー壁に電荷変異体を光化学的に固定化し,ワサビペルオキシダーゼに共役させた二次抗体IgGを用いてモノクローナル抗体を調べた。化学ルミネセンスによって決定した電荷不均一性は精製モノクローナル抗体及び夾雑モノクローナル抗体について吸光度検出を用いた等電点分画技法による測定結果に類似していた。

シソーラス用語： *等電点分画 ,  *キャピラリー電気泳動 ,  *免疫学的試験 ,  *モノクローナル抗体 ,  *電荷分布 ,  不均一性 ,  pH依存性 ,  検出 ,  突然変異体 ,  免疫グロブリンG ,  セイヨウワサビペルオキシダーゼ ,  カルボキシペプチダーゼ ,  酵素反応 ,  画像処理 ,  ダイナミックレンジ ,  検出限界 ,  測定精度 ,  再現性
準シソーラス用語： *CIEF【分画】 ,  NanoPro ,  イメージング ,  カルボキシペプチダーゼB ,  ワサビペルオキシダーゼ ,  化学ルミネセンス検出 ,  変異体 ,  二次抗体

分類 (2件)： 生物物理的研究法  (EA03020V) ,  抗原・抗体・補体一般  (ED04010A)

タイトルに関連する用語 (8件)： 化学ルミネセンス検出 ,  多重 ,  イメージ ,  キャピラリー等電点分画 ,  イムノアッセイ ,  モノクローナル抗体 ,  電荷 ,  不均一性