ブタのDicerのクローニングと発現およびブタ胚におけるマイクロRNA発現に及ぼす発生段階と培養条件の影響

STOWE Heather M.; CURRY Erin; CALCATERA Samantha M.; KRISHER Rebecca L.; PACZKOWSKI Melissa; PRATT Scott L.

文献

J-GLOBAL ID：201202217845233485 整理番号：12A0747142

ブタのDicerのクローニングと発現およびブタ胚におけるマイクロRNA発現に及ぼす発生段階と培養条件の影響

Cloning and expression of porcine Dicer and the impact of developmental stage and culture conditions on MicroRNA expression in porcine embryos

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資料名：
巻： 501 号： 2 ページ： 198-205 発行年： 2012年06月15日
JST資料番号： E0701B ISSN： 0378-1119 資料種別：逐次刊行物 (A)
記事区分：原著論文発行国：オランダ (NLD) 言語：英語 (EN)

マイクロRNA(miRNA)は低分子,一本鎖リボ核酸の一種で,遺伝子発現を転写後に調節し,体細胞,生殖細胞,および胚発生に関与する。成熟したmiRNAの生成に関与する酵素として,DicerはmiRNA生成に重要である。飼育ブタ(Sus scrofa)については,Dicerの特性化とヌクレオチドレベルでのその発現,および生殖組織におけるmiRNA発現の同定はまだ報告されていない。本研究において,筆者らはブタのDicer(pDicer)の一次cDNA配列を決定し,ブタの卵母細胞と初期胚におけるその発現を確認し,そして初期胚発生の過程とin vivo(IVO)とin vitro(IVF)で形成された胚の間での特定のmiRNAの発現について評価した。pDicer mRNAの発現は卵母細胞とIVOで形成された胚盤胞期胚で検出された。RT-PCRアレイはヒトmiRNAのために設計されたプライマーを用いて行われ,中期II卵母細胞(MII)と初期胚において86の推定上のブタmiRNAが検出された。8-細胞期(8C)胚ではMIIや胚盤胞(B)に比して検出されたmiRNAは少なかった(それぞれP=0.026とP<0.0001)。(調査した88中の)21のmiRNAはMIIと8C,8CとB,またはMIIとBの間で差次的に発現された。差次的に発現されたmiRNAの標的とされる転写産物は細胞の発生と分化に関連する遺伝子オントロジー(GO)カテゴリーに多かった。定量的RT-PCRがIVOとIVFで形成された個々の胚から単離した胚盤胞の全細胞RNA(tcRNA)のmiR-18a,-21,および-24について行われた。miR-24の発現レベルだけが培養条件によって異なり,IVO胚では検出されるレベルがより低かった。これらのデータはpDicerとmiRNAはブタの卵母細胞と胚に存在することを示す。それに加えて,特異的miRNAレベルは胚発生の段階によって変化し,miR-24の場合は培養条件によって変化することから,このmiRNAは胚の品質のスクリーニングの候補になる。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

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遺伝子の構造と化学

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