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J-GLOBAL ID：201202218960171937   整理番号：12A1353180

音響駆動泡ベース迅速ミクロミキサによる酵素反応定数K_m及びk_catの単一ショットキャラクタリゼーション

Single-Shot Characterization of Enzymatic Reaction Constants Km and kcat by an Acoustic-Driven, Bubble-Based Fast Micromixer

著者 (7件)： XIE Yuliang (Pennsylvania State Univ., Pennsylvania, USA) ,  AHMED Daniel (Pennsylvania State Univ., Pennsylvania, USA) ,  LAPSLEY Michael Ian (Pennsylvania State Univ., Pennsylvania, USA) ,  LIN Sz-Chin Steven (Pennsylvania State Univ., Pennsylvania, USA) ,  NAWAZ Ahmad Ahsan (Pennsylvania State Univ., Pennsylvania, USA) ,  WANG Lin (Ascent Bio-Nano Technol. Inc., Pennsylvania, USA) ,  HUANG Tony Jun (Pennsylvania State Univ., Pennsylvania, USA)
資料名： Analytical Chemistry  (Analytical Chemistry)
巻： 84  号： 17  ページ： 7495-7501  発行年： 2012年09月04日 
JST資料番号： A0395A  ISSN： 0003-2700  CODEN： ANCHAM  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 酵素ベースアッセイの主要な目的はMichaelis-Menten定数(K_m),ターンオーバー数(k_cat)など酵素反応定数を正確に知ることである。酵素反応定数を計算するため,Michaelis-Menten動力学式からの初期反応速度と基質濃度の逆数線形回帰を用いる方法が確立されているが,本研究では酵素反応定数を測定するための,音響泡ベースミクロフルイディクスミキサを用いるオンチップ単一ショットキャラクタリゼーション法を提案した。ここに用いた音響フルイディクスデザインは流体中に渦を生成させるために圧電変換器によって刺激することができる馬蹄状構造に定着させた泡からなるもので,渦によって酵素と基質を100msec以内に混合させた後,種々の基質濃度についての反応速度曲線からK_m及びk_catを得た。β-ガラクトシダーゼ及びその基質,レソルフィン-β-D-ガラクトピラノシドについての酵素反応を調べたところ,公表されているデータに一致した定数を得ることができた。このアプローチでは混合時間をmsec範囲に短縮することで,酵素反応定数特性化効率を増加させることができるが,このことは少量の酵素,基質あるいは抑制剤を用いる高速酵素反応動力学研究に有用であった。またこのアプローチは高速酵素反応及び他の化学反応動力学研究にも適用できると考察した。

シソーラス用語： *Michaelis定数 ,  *ターンオーバー数 ,  *フルイディクス ,  *混合装置 ,  酵素反応 ,  気泡 ,  渦 ,  音響効果 ,  ポリジメチルシロキサン ,  チャネル流 ,  変換器 ,  放射強度 ,  反応速度 ,  β-ガラクトシダーゼ ,  ピラノシド ,  データ解析 ,  回帰モデル ,  キャラクタリゼーション ,  測定精度 ,  時間圧伸 ,  基質 ,  窒素複素環化合物 ,  フェノール類 ,  酸素複素環化合物 ,  共役ジエン ,  エノン ,  芳香族縮合化合物 ,  *マイクロフルイディクス
準シソーラス用語： *ミキサ ,  *ミクロフルイディクス ,  圧電変換器 ,  蛍光強度 ,  時間短縮 ,  線形回帰モデル ,  泡

分類 (2件)： 酵素一般  (EB09010D) ,  生物科学研究法一般  (EA03010K)

物質索引 (1件)： レソルフィン

タイトルに関連する用語 (7件)： 音響 ,  泡 ,  ミキサ ,  酵素反応 ,  定数 ,  ショット ,  キャラクタリゼーション