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J-GLOBAL ID：201202232481029959   整理番号：12A0866975

Escherichia coli(大腸菌)からのマンノース-6-リン酸塩イソメラーゼ遺伝子(manA/pmi)のクローニングと特性評価

Cloning and Characterization of Mannose-6-phosphate Isomerase Gene (manA/pmi)from Escherichia coli

著者 (4件)： YANG Xin (State Key Lab. of Plant Genomics Inst. of Microbiology Chinese Acad. ofSciences, Taiyuan) ,  LIANG Aihua (Inst. of Biotechnology Shanxi Univ., Taiyuan) ,  LUO Xiaoli (Inst. of Cotton Shanxi Acad. of Agriculture Sciences, Yuncheng) ,  WU Jiahe (State Key Lab. of Plant Genomics Inst. of Microbiology Chinese Acad. ofSciences, Taiyuan)
資料名： Huabei Nongxuebao  (Huabei Nongxuebao)
巻： 26  号： 2  ページ： 107-110  発行年： 2011年 
JST資料番号： C2462A  ISSN： 1000-7091  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： 中国 (CHN)  言語： 中国語 (ZH)

抄録/ポイント： マンノース-6-リン酸塩イソメラーゼ(PMI)をmanA/pmi遺伝子によってコード化した。この遺伝子は,選択マーカーとして植物の形質転換のために使用されているいくつかの細菌類からのものである。新規pmi遺伝子を,E.coli(大腸菌)DH10種から,相同配列に従ってPCR方法によってクローン化した。次に,pmi遺伝子をともに抱く真核生物のベクターpEPMiと植物発現ベクタpCPMiをそれぞれ構築した。ヒスチジンタグを持つ真核生物のベクターpEPMiを,大腸菌に変換し,PMI蛋白質を発現した。SDS-PAGEゲルに関する単一バンドを,PMI蛋白質分離間の緩衝器におけるイミダゾール濃度を最適化することによって提示した。次に,ウエスタンブロットアッセイは,誘起目標蛋白質がPMI蛋白質融解ヒスチジンタグで,蛋白質サイズが約46kDaであると確認した。酵素反応解析の結果は,PMIがマンノース-6-リン酸塩を果糖-6-リン酸塩へ高能率で転化促進したことを示した。さらに,植物発現ベクタpCPMiをAgrobacterium媒介システムによってタバコに変換した。そして,96独立タバコ形質転換体のうち,72がpmi遺伝子を含んでいることをPCR検出で確認した。新規pmi遺伝子を一種の安全な選択マーカーとして,植物形質転換で直接使用できる。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST

シソーラス用語： *大腸菌 ,  リン酸塩 ,  キャラクタリゼーション ,  ウェスタンブロット法 ,  トランスジェニックタバコ ,  アフィニティー標識 ,  形質転換 ,  PCR法 ,  分離 ,  ヘキソース ,  アルドース ,  窒素複素環化合物 ,  クローニング ,  植物形質転換 ,  蛋白質分離 ,  ヒスチジン標識 ,  *微生物 ,  バイオアッセイ ,  生物
準シソーラス用語： *Escherichia coli ,  特性評価 ,  ウェスタンブロットアッセイ ,  タバコ形質転換体 ,  ヒスチジンタグ ,  PCR検出

分類 (1件)： 分子遺伝学一般  (EC02010J)

物質索引 (2件)： マンノース ,  イミダゾール

タイトルに関連する用語 (9件)： Escherichia ,  大腸菌 ,  マンノース-6-リン酸 ,  塩 ,  イソメラーゼ ,  遺伝子 ,  PMI ,  クローニング ,  特性評価