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J-GLOBAL ID：201202236983871837   整理番号：12A1444872

超好熱性古細菌Thermococcus pacificusからのdUTPアーゼの特性解析とPCRへの応用

Characterization and PCR applications of dUTPase from the hyperthermophilic euryarchaeon Thermococcus pacificus

著者 (5件)： CHO Sung Suk (Dep. of Biotechnology and Bioengineering, Sungkyunkwan Univ., 300 Cheoncheon-dong, Jangan-gu, Suwon 440-746, KOR) ,  SUN Younguk (Dep. of Biotechnology and Bioengineering, Sungkyunkwan Univ., 300 Cheoncheon-dong, Jangan-gu, Suwon 440-746, KOR) ,  YU Mi (Dep. of Biotechnology and Bioengineering, Sungkyunkwan Univ., 300 Cheoncheon-dong, Jangan-gu, Suwon 440-746, KOR) ,  KWON Suk Hyung (Rexgene Biotech Co., Ltd., 9 F Wooyoung Venture Bldg. 1330-13 Seocho-dong, Seocho-gu, Seoul 137-070, KOR) ,  KWON Suk-tae (Dep. of Biotechnology and Bioengineering, Sungkyunkwan Univ., 300 Cheoncheon-dong, Jangan-gu, Suwon 440-746, KOR)
資料名： Enzyme and Microbial Technology  (Enzyme and Microbial Technology)
巻： 51  号： 6-7  ページ： 342-347  発行年： 2012年12月10日 
JST資料番号： A0989B  ISSN： 0141-0229  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： Thermococcus pacificusのdUTPアーゼ(Tpa dUTPアーゼ)をクローニングし,塩基配列を決定した。Tpa dUTPアーゼ遺伝子は471bpから成り,156アミノ酸の蛋白質をコードしている。Tpa dUTPアーゼの推定アミノ酸配列は,他の古細菌dUTPアーゼと高い配列の類似性を持っている。Tpa dUTPアーゼは,アミノ酸配列に基づいて計算された17801Daの分子量と一致し,18-kDaの主要な蛋白質バンドを持っていた。dUTPに対するTpa dUTPアーゼの比活性は85°Cで90,909U/mgであった。Tpa dUTPアーゼの活性の至適pHは8.5,至適温度は85°Cであった。マグネシウムイオンは強く活性を誘導し,その最適濃度は0.75mMであった。酵素の半減期は94°Cで約7hであった。dUTPに対するTpa dUTPアーゼの比活性は,dCTPに対するTpa dUTPアーゼの比活性よりも10~20倍高かった。PfuおよびVent DNAポリメラーゼを使用したとき,Tpa dUTPアーゼは長いターゲットのPCR増幅効率を促進した。Copyright 2012 Elsevier B.V., Amsterdam. All rights reserved. Translated from English into Japanese by JST.

シソーラス用語： *古細菌 ,  高温菌 ,  *ピロホスファターゼ ,  PCR法 ,  アミノ酸配列 ,  マグネシウム ,  DNAポリメラーゼ ,  基質特異性 ,  温度依存性
準シソーラス用語： *dUTPアーゼ ,  *Thermococcus pacificus

分類 (2件)： 遺伝子操作  (EC02050B) ,  微生物の生化学  (EG03020N)

物質索引 (1件)： dUTP

タイトルに関連する用語 (7件)： 好熱性 ,  古細菌 ,  Thermococcus ,  dUTPアーゼ ,  特性解析 ,  PCR ,  応用