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J-GLOBAL ID:201202244375272702   整理番号:12A1164821

骨格的に完全発達及び老齢の両マウス長骨由来1次骨細胞の分離及び培養

Isolation and culture of primary osteocytes from the long bones of skeletally mature and aged mice
著者 (6件):
資料名:
巻: 52  号:ページ: 361-362,364,366,368,370-373  発行年: 2012年06月 
JST資料番号: C0930C  ISSN: 0736-6205  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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骨格的に完全発達した若齢(4箇月)及び老齢(22箇月)の両マウス長骨から骨細胞を分離・検討できる骨細胞分離技術を開発した。軟組織や骨膜,骨髄,骨端などを除去した後にEDTAベースの脱石灰化を併用した広域コラゲナーゼ消化により長骨から骨細胞を分離した。なお,骨細胞調製の詳細なプロトコールを一覧表で示した。次いで,組織ホモジナイザで残存骨断片を除去し,骨細胞様細胞を培養して増殖した。in vitroで骨細胞の検討を容易にするために既報にて分離した不死化骨細胞様細胞系であるMLO-Y4やMC3T3-E1,SW3を対照細胞として使用した。取得した全細胞は骨細胞マーカーであるE11/GP38に対して陽性に染色される骨細胞様形態を示した。更に,骨細胞表現型をアルカリホスファターゼ欠如性及びコラーゲン1a1非発現性で確認した。また,骨細胞の増殖ではSost及びMepe両遺伝子のような骨細胞特異的追加遺伝子が発現していた。
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分類 (4件):
分類
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骨格系  ,  遺伝子の構造と化学  ,  細胞分裂・増殖  ,  運動器系の基礎医学 
物質索引 (1件):
物質索引
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