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J-GLOBAL ID:201202250986769602   整理番号:12A0202143

GSK3β遺伝子の3つのshRNAを発現している真核生物ベクターの構築

Construction of Eukaryotic Vector Expressing Three shRNAs of GSK3β Gene
著者 (6件):
資料名:
巻: 37  号:ページ: 495-499  発行年: 2010年 
JST資料番号: C2526A  ISSN: 1000-8578  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: 中国 (CHN)  言語: 中国語 (ZH)
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【目的】GSK3β低分子ヘアピン型RNA(shRNA)干渉を用いる選択的阻害GSK3β発現の実現可能性を探究する。【方法】GSK3β遺伝子をターゲットとする3つの19bp逆転を繰り返したモチーフを合成し,RNAポリメラーゼの3つのU6shRNAプロモーターと終結信号を含有している真核生物発現プラスミドpsh RNA-U3にクローン化した。組換えプラスミドpsh RNA-U3/GSK3βとpsh RNA-U3/conをリポフェクタミン試薬によりOV2008細胞に各々トランスフェクトした。GSK3β発現の変化を,リアルタイムPCR法とウェスタンブロット法により検査した。【結果】部分的ヌクレオチド配列解析により,GSK3βの3つのshRNAを発現している組立真核生物ベクターが正しいことを確かめた。psh RNA-U3/GSK3βにより劇的にトランスフェクトされたOV2008細胞は,非トランスフェクト対照細胞と比較して,GSK3βmRNAと蛋白質発現をダウンレギュレートした。【結語】shRNAは,OV2008細胞においてGSK3β発現を効率的に抑えることができる。本研究結果は,GSK3βの生物学的機能と適用可能性に関する更なる研究の基礎を築いた。Data from the ScienceChina, LCAS. Translated by JST
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分類 (1件):
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分子遺伝学一般 

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