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J-GLOBAL ID:201202258866196030   整理番号:12A0146233

DNAクローニングおよびStreptomyces coelicolorへハイスループット接合させる非制限および非メチル化大腸菌株

A Non-Restricting and Non-Methylating Escherichia coli Strain for DNA Cloning and High-Throughput Conjugation to Streptomyces coelicolor
著者 (15件):
資料名:
巻: 64  号:ページ: 185-190  発行年: 2012年02月 
JST資料番号: H0506A  ISSN: 0343-8651  CODEN: CUMIDD  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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DNAをクローニングして属間接合によりプラスミドを転位させることを目的として,大腸菌株を用いて二次代謝研究をした。非制限株はDNAのクローニングに望ましく,非メチル化株はDNAをStreptomyces coelicolorのようなメチル制限宿主への転位に有用である。DNAメチル化遺伝子dcmとdamの欠失により,非メチル化大腸菌株JTU007を構築した。JTU007を,39kbのアクチノロジン生合成遺伝子クラスターをS.lividansとS.coelicolorへ接合伝達させるドナーとして用いた。Dcm-Dam-JTU007株は,DNAをS.coelicolor A(3)2へ高頻度で転位させた。広範囲なS.toxytriciniのゲノムコスミドライブラリを構築し,ハイスループット接合を用いてメチル制限S.coelicolorへ転位させた。その結果,JTU007は一次クローニングにおいてメチル化DNAを制限せず,より高い形質転換とコスミド感化頻度を与えた。Copyright 2011 Springer Science+Business Media, LLC Translated from English into Japanese by JST.
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分類 (2件):
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微生物の生化学  ,  遺伝子操作 
物質索引 (1件):
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