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J-GLOBAL ID:201202260111098785   整理番号:12A1520160

非常に効率的なG-四重螺旋ベースDNAザイムのin vitro選択

In Vitro Selection of Highly Efficient G-Quadruplex-Based DNAzymes
著者 (8件):
資料名:
巻: 84  号: 19  ページ: 8383-8390  発行年: 2012年10月02日 
JST資料番号: A0395A  ISSN: 0003-2700  CODEN: ANCHAM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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良好なペルオキシダーゼ活性を有するG-四重螺旋ベースDNAザイムを得る目的で,ヘミンアガロースビーズを用いたSELEXによってヘミン結合DNAアプタマーを発生させるために,45-ntのランダム領域に25%,35%及び45%のグアニン塩基を含む3種の81-nt ssDNAライブラリーを設計した。先端を切り取ったアプタマ[B7]-3-0が並列G-四重螺旋構造に折畳まれ,最高のペルオキシダーゼ活性及びKd 29±4nMでのヘミンへの強い結合親和性を示した。また5′側面に位置するヌクレオチドを有するコアG-モチーフシーケンスが3′側面に位置するヌクレオチドを有するものよりも高ペルオキシダーゼ活性を示し,5′側面に位置するヌクレオチドの数がペルオキシダーゼ活性に影響を及ぼすことが分かった。また2′-O-メチル修飾は並列G-四重螺旋[B7]-3-0の自己組織化を促進し,ペルオキシダーゼ活性を促進することから,他のシーケンスよりも高いペルオキシダーゼ様活性を有するG-四重螺旋シーケンスを識別し,ペルオキシダーゼベースバイオアッセイの分析的性能を改善するためにこれを使用した。ssDNAライブラリー及びヘミンアガロースビーズを用いたin vitro選択によって,並列G-四重螺旋を形成させ,最高のペルオキシダーゼ活性を示すシーケンス[B7]-3-0を得ることができた。
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分類 (2件):
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酵素一般  ,  遺伝子操作 
タイトルに関連する用語 (2件):
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