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J-GLOBAL ID:201202271717749309   整理番号:12A0930319

個々の菌糸の化学マッピングを組合わせた細胞内代謝産物のオンターゲット標識化がアイソトポログの細胞質再配置を明らかにする

On-Target Labeling of Intracellular Metabolites Combined with Chemical Mapping of Individual Hyphae Revealing Cytoplasmic Relocation of Isotopologues
著者 (3件):
資料名:
巻: 84  号: 11  ページ: 5110-5116  発行年: 2012年06月05日 
JST資料番号: A0395A  ISSN: 0003-2700  CODEN: ANCHAM  資料種別: 逐次刊行物 (A)
記事区分: 原著論文  発行国: アメリカ合衆国 (USA)  言語: 英語 (EN)
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マトリックス支援レーザ脱離/イオン化質量分析及びマトリックスなしレーザ脱離/イオン化質量分析によって組織切片中の生体分子の検出及びイメージングが可能であり,またこれらとともに用いられる同位体標識化によって単細胞試料における代謝活性を明らかにすることができる。本研究では単細胞解像度を有する質量分析イメージングとともに,微生物細胞培養及び同位体標識化を統合したマイクロスケール分析プラットフォームを開発し,真菌性菌糸体中の細胞代謝モニタリングに適用した。この方法は疎水性及び親水性ゾーンからなる二次元表面パターンを有するオープンチップをインプリメントしたもので,ふたつの親水性島は媒質リザーバとしての役目を担い,一方,疎水性領域は成長している空中菌糸のための支持体を構成している。12C6グルコース媒質を含む最初の島に,初めに菌糸体,Neurospora crassaを接種し,初期培養期間後,同位体標識化基質(13C6グルコース)を含む第二媒質島の方へ菌糸を進展させた。特性同位体パターンの質量スペクトル記録によって,キチン生合成前駆体,ウリジン二リン酸N-アセチルグルコサミン(UDP-GlcNAc)の破壊をモニタリングした。この方法によって真菌性菌糸体中の13C標識化UDP-GlcNAcのマッピングとチップ上の菌糸中の再分配を記録することができた。
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分類 (4件):
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代謝一般  ,  質量分析  ,  図形・画像処理一般  ,  細胞・組織培養法 

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