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J-GLOBAL ID：201202298422351619   整理番号：12A0302303

Arthrobacter phenanthrenivoransからの2つの1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸ジオキシゲナーゼの異種発現と特性解析

Heterologous Expression and Characterization of Two 1-Hydroxy-2-Naphthoic Acid Dioxygenases from Arthrobacter phenanthrenivorans

著者 (6件)： VANDERA Elpiniki (Univ. Ioannina, Ioannina, GRC) ,  KAVAKIOTIS Konstantinos (Univ. Ioannina, Ioannina, GRC) ,  KALLIMANIS Aristeidis (Univ. Ioannina, Ioannina, GRC) ,  KYRPIDES Nikos C. (Dep. of Energy Joint Genome Inst., California, USA) ,  DRAINAS Constantin (Univ. Ioannina, Ioannina, GRC) ,  KOUKKOU Anna-Irini (Univ. Ioannina, Ioannina, GRC)
資料名： Applied and Environmental Microbiology  (Applied and Environmental Microbiology)
巻： 78  号： 3  ページ： 621-627  発行年： 2012年02月 
JST資料番号： A0427A  ISSN： 0099-2240  CODEN： AEMIDF  資料種別： 逐次刊行物 (A)
記事区分： 原著論文  発行国： アメリカ合衆国 (USA)  言語： 英語 (EN)

抄録/ポイント： 多環芳香族炭化水素の分解をする酵素を得るため,ギリシャのクレオソート油汚染場所から単離した新種A.phenanthrenivorans Sphe3株から1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸(1-H2NA)ジオキシゲナーゼ活性画分を部分精製し,SDS-PAGEの銀染で見かけの分子量45kDaの蛋白質を主成分とすることを見つけ,MALDI-TOF MSとMS-MS解析からNocardioides種株KP7の同酵素と類似の配列を検出した。ゲノムのBLSAT解析で候補の遺伝子を2つ見つけ,diox1とdiox2と命名した。両者はヌクレオチド配列で90%,アミノ酸配列で85%の一致を示したが,前者は常在性プラスミド,後者は染色体に局在し,複製転移が示唆された。フェナントレンを唯一の炭素源・エネルギー源とする培地でこの細菌を培養するといずれも発現誘導され,diox2の発現量の方が多かった。PCRで増幅し大腸菌に導入・発現すると,どちらもこの酵素活性を示し,Kmは30μM程度,Kcat/Kmはほぼ10⁷M^-1s^-1だった。

シソーラス用語： *単供与体オキシゲナーゼ ,  Arthrobacter ,  精製 ,  分子量 ,  アミノ酸配列 ,  ヌクレオチド配列 ,  酵素反応速度論 ,  新種 ,  芳香族縮合炭化水素
準シソーラス用語： *1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸ジオキシゲナーゼ ,  Arthrobacter phenanthrenivorans

分類 (1件)： 酵素一般  (EB09010D)

物質索引 (1件)： フェナントレン

タイトルに関連する用語 (5件)： Arthrobacter ,  1-ヒドロキシ-2-ナフトエ酸 ,  ジオキシゲナーゼ ,  異種発現 ,  特性解析