RNAの直接検出法

発明者： , ,
出願人/特許権者：
代理人 (1件)：葛和清司
公報種別：公開公報
出願番号（国際出願番号）：特願2010-271842
公開番号（公開出願番号）：特開2012-080871
出願日： 2010年12月06日
公開日（公表日）： 2012年04月26日
要約：

【課題】新規な簡便迅速で実用的な、試料中のRNAを検出する方法を提供すること。【解決手段】本発明は、生物由来の夾雑物を含む試料中のRNAの検出方法であって、(1)検出対象のRNAに相補的な配列を有する一本鎖DNAを環状化し、環状化一本鎖DNAプローブを作製する工程、(2)前記(1)において得られた環状化一本鎖DNAプローブと、試料中のRNAとをハイブリダイズさせる工程、(3)前記(2)において得られたRNA-DNAハイブリッドから、RNAをプライマーとしてローリングサークル増幅法(RCA)により一本鎖DNAを合成する工程、(4)前記(3)において合成された一本鎖DNAに結合する標識を添加し、当該標識を検知することによって検出対象のRNAを検出する工程、さらに任意に前記(2)の後に(5)RNase HによりRNA/DNAハイブリッドのRNA鎖のみにニックを形成する工程を含む、前記方法に関する。【選択図】図1

請求項（抜粋）：

生物由来の夾雑物を含む試料中のRNAの検出方法であって、 (1)検出対象のRNAに相補的な配列を有する一本鎖DNAを環状化し、環状化一本鎖DNAプローブを作製する工程、 (2)前記(1)において得られた環状化一本鎖DNAプローブと、試料中のRNAとをハイブリダイズさせる工程、 (3)前記(2)において得られたRNA-DNAハイブリッドから、RNAをプライマーとしてローリングサークル増幅法(RCA;Rolling Circle Amplification)により一本鎖DNAを合成する工程、 (4)前記(3)において合成された一本鎖DNAに結合する標識を添加し、当該標識を検知することによって検出対象のRNAを検出する工程を含む、前記方法。

IPC (2件)：

C12Q 1/68 , C12Q 1/04

FI (2件)：

C12Q1/68 A , C12Q1/04

Fターム (11件)：

4B024AA11 , 4B024CA09 , 4B024HA12 , 4B063QA01 , 4B063QQ05 , 4B063QQ52 , 4B063QR32 , 4B063QR56 , 4B063QS24 , 4B063QS34 , 4B063QX02

引用文献：

審査官引用 (4件)

Epicentre Forum Newsletter, 2009 Jun, 16(2), pp.7-9
Anal. Chem., 2009 Jun, 81(12), pp.4906-4913
実験医学別冊遺伝子工学ハンドブック、第2刷、株式会社羊土社、1991年、36〜38頁

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